（浙江選考）2020版高考生物一輪復(fù)習(xí) 第35講 克隆技術(shù)夯基提能作業(yè)本（含解析）

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1、克隆技術(shù) 第35講　克隆技術(shù) A組　基礎(chǔ)過(guò)關(guān) 1.(2018天津理綜,2,6分)蘆筍是雌雄異株植物,雄株性染色體為XY,雌株為XX;其幼莖可食用,雄株產(chǎn)量高。以下為兩種培育雄株的技術(shù)路線。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.形成愈傷組織可通過(guò)添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行誘導(dǎo) B.幼苗乙和丙的形成均經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程 C.雄株丁的親本的性染色體組成分別為XY、XX D.與雄株甲不同,雄株丁培育過(guò)程中發(fā)生了基因重組 答案　C　本題主要考查育種的相關(guān)知識(shí)。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,利用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)愈傷組織的形成與分化,A正確;由花粉形成單倍體幼苗乙、丙的過(guò)程包括脫分化、再分化兩個(gè)階段,B

2、正確;雄株丁的親本乙、丙由雄株的花粉經(jīng)單倍體育種培育而來(lái),只有植物乙、丙的性染色體組成為XX、YY時(shí),雄株丁的性染色體組成才為XY,C錯(cuò)誤;雄株丁的培育過(guò)程中經(jīng)歷了減數(shù)分裂產(chǎn)生花粉的過(guò)程,該過(guò)程中發(fā)生了基因重組,D正確。 2.下列關(guān)于克隆技術(shù)的敘述中,正確的是(　　) A.細(xì)胞克隆的主要用途之一是篩選出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系 B.在培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl,不能篩選出抗鹽突變體 C.植物經(jīng)多次繼代培養(yǎng)后不會(huì)喪失全能性的表達(dá)能力 D.有限細(xì)胞系比無(wú)限細(xì)胞系更容易克隆 答案　A　細(xì)胞克隆的主要用途之一是篩選出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系,A正確;在培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl,可

3、以篩選出抗鹽突變體,B錯(cuò)誤;有些植物(如小麥、水稻等)經(jīng)多次繼代培養(yǎng)后會(huì)喪失全能性的表達(dá)能力,C錯(cuò)誤;無(wú)限細(xì)胞系比有限細(xì)胞系更容易克隆,因?yàn)闊o(wú)限細(xì)胞系對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力和獨(dú)立生存能力更強(qiáng),D錯(cuò)誤。 3.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞 C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控 D.生根時(shí),培養(yǎng)基通常應(yīng)含α-萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑 答案　B　植物組織培

4、養(yǎng)中消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)培養(yǎng)材料的傷害;植物體細(xì)胞的雜交需先除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體,再在細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑作用下獲得染色體加倍的細(xì)胞;細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá);植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,生根階段的培養(yǎng)基中通常應(yīng)含有生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑。 4.應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù),不僅可實(shí)現(xiàn)種苗的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株,也可加快作物及苗木育種。下面是培育柑橘耐鹽植株的實(shí)驗(yàn)流程: 莖段→愈傷 組織挑選生長(zhǎng)的 愈傷組織→耐鹽植株 回答下列問(wèn)題: (1)愈傷組織是由離體的莖段經(jīng)　　　　　　　過(guò)程形成的,此時(shí)愈傷組織細(xì)胞　　　　　(填“具有”或“不具有”)細(xì)胞的全能性。? (2)對(duì)

5、愈傷組織進(jìn)行了兩次處理,處理1中γ射線照射的目的是　　　　　　　 　　,用γ射線不直接處理莖段而是處理愈傷組織,原因是　　　　　　　　　　　　 　　　　　　;處理2中添加的物質(zhì)X為　　　　。? (3)植物組織培養(yǎng)技術(shù)也被廣泛應(yīng)用于其他作物的育種中。在培育白菜—甘藍(lán)、三倍體無(wú)籽西瓜、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得的抗蟲(chóng)棉中,必須用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是　　　　　　　　　　　　。? 答案　(1)脫分化　具有　(2)誘發(fā)基因突變　愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng),易誘發(fā)基因突變　NaCl(或鹽)(3)白菜—甘藍(lán)、抗蟲(chóng)棉 解析　(1)離體的莖段經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程可形成愈傷組織,此時(shí)愈傷組織具有未分化的特點(diǎn),細(xì)胞具有較高

6、的全能性。(2)圖中對(duì)愈傷組織進(jìn)行了兩次處理,第一次處理是用γ射線照射誘發(fā)愈傷組織細(xì)胞發(fā)生基因突變。愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng),易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而發(fā)生基因突變。第二次處理是抗鹽接種實(shí)驗(yàn),即在培養(yǎng)基中加入氯化鈉,適應(yīng)一定濃度鹽的愈傷組織才可以生長(zhǎng),不適應(yīng)的愈傷組織死亡。(3)作物育種研究中常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含抗蟲(chóng)基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物體細(xì)胞中,再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗蟲(chóng)的農(nóng)作物。運(yùn)用細(xì)胞工程培育白菜—甘藍(lán)雜種植株,需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株。 5.[2016浙江4月選考,32(二),7分]回答下列問(wèn)題: 兔肝細(xì)胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶,擬利用基因工程技

7、術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中,以提高矮牽牛對(duì)甲醛的代謝能力,請(qǐng)回答: (1)從兔肝細(xì)胞中提取mRNA,在　　　　酶的作用下形成互補(bǔ)DNA,然后以此DNA為模板擴(kuò)增得到基因E。在相關(guān)酶的作用下,將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起,形成　　　,再導(dǎo)入用氯化鈣處理的　　　　,侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng),最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過(guò)程正確的是　　　　。(A.葉片在含適宜濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織　B.愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽　C.再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根　D.愈傷組織在含適宜濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株)? (2

8、)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片,放入含MS液體培養(yǎng)基和適宜濃度甲醛且密封的試管中。將試管置于　　　　上,進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛的含量,以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。培養(yǎng)過(guò)程中液體培養(yǎng)基的作用:一是提供營(yíng)養(yǎng);二是　　　　　　,從而使葉片保持正常的形態(tài)。? 答案　(1)逆轉(zhuǎn)錄　重組質(zhì)粒(重組DNA分子)　農(nóng)桿菌　B　(2)搖床　維持滲透壓 解析　(1)以mRNA為模板合成DNA的過(guò)程叫逆轉(zhuǎn)錄,該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶;將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起,形成重組質(zhì)粒(或重組DNA分子);將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞,一般用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,即先將重組質(zhì)粒導(dǎo)入用氯化鈣處理的農(nóng)桿菌,再用農(nóng)桿菌去

9、侵染植物葉片,從而將目的基因?qū)胫参锶旧wDNA中。將重組細(xì)胞培養(yǎng)成植物需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)的過(guò)程,葉片細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,A錯(cuò)誤;愈傷組織的分化,一般先長(zhǎng)芽,即在細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素比例較高的培養(yǎng)基中培養(yǎng),B正確;生根需要放在生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例較高的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng),C錯(cuò)誤;愈傷組織形成再生植株的過(guò)程為再分化,D錯(cuò)誤。(2)如果愈傷組織形成后要進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng),應(yīng)將試管置于搖床上,通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞,再由單細(xì)胞發(fā)育成胚狀體,進(jìn)而發(fā)育成植株。液體培養(yǎng)基除了提供營(yíng)養(yǎng),還維持滲透壓使葉片保持正常的形態(tài)。 6.請(qǐng)回答與雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備有關(guān)的問(wèn)題。 (1)利用雜交瘤技術(shù)制

10、備單克隆抗體時(shí),利用一定的物質(zhì),如生物誘導(dǎo)劑　　　　作介導(dǎo),使經(jīng)免疫的小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出融合的細(xì)胞再進(jìn)行細(xì)胞的　　　　培養(yǎng),獲得純系細(xì)胞,同時(shí)還要進(jìn)行　　　檢驗(yàn),以保證獲得的是所需的特定雜交瘤細(xì)胞。? (2)獲得雜交瘤細(xì)胞后,在體外培養(yǎng)時(shí)需要特別加入的天然成分是　　　　。? (3)有關(guān)雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)的敘述,正確的是　　　　。? A.用固體培養(yǎng)基培養(yǎng) B.用滋養(yǎng)層細(xì)胞支持生長(zhǎng) C.能進(jìn)行傳代培養(yǎng) D.需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行研磨破碎獲得產(chǎn)物 (4)現(xiàn)在欲利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體,科研小組將與抗體形成有關(guān)的關(guān)鍵基因通過(guò)噬菌體導(dǎo)入受體細(xì)胞,該技術(shù)的核心步驟是　　　　　　

11、　　,噬菌體是這些關(guān)鍵基因的　　　　。? 答案　(1)滅活的(仙臺(tái))病毒　克隆　抗體　(2)動(dòng)物血清 (3)C　(4)形成重組DNA分子　載體 解析　誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等;在單克隆抗體制備過(guò)程中,一般認(rèn)為有兩次篩選過(guò)程,第一次是篩選出雜交瘤細(xì)胞(用選擇培養(yǎng)基),第二次是進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,除需要正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外,還需加入血清、血漿等一些天然成分。(1)制備單克隆抗體時(shí),可利用生物誘導(dǎo)劑滅活的(仙臺(tái))病毒介導(dǎo),使經(jīng)免疫的小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合;為保證獲得的是所需的特定雜交瘤細(xì)胞,篩選出融合的細(xì)

12、胞后需再進(jìn)行細(xì)胞的克隆化培養(yǎng),獲得純系細(xì)胞,同時(shí)還要進(jìn)行抗體檢驗(yàn)。(2)獲得雜交瘤細(xì)胞后,在體外培養(yǎng)時(shí)需要特別加入的天然成分是動(dòng)物血清。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需用液體培養(yǎng)基,A項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞克隆需要滋養(yǎng)細(xì)胞(如經(jīng)射線照射本身失去增殖能力的小鼠成纖維細(xì)胞)提供營(yíng)養(yǎng)支持生長(zhǎng),B項(xiàng)錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞在適宜條件下能無(wú)限增殖,所以能進(jìn)行傳代培養(yǎng),C項(xiàng)正確;雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體會(huì)分泌到培養(yǎng)液中,所以不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行研磨破碎獲得產(chǎn)物,D項(xiàng)錯(cuò)誤。(4)基因工程的核心步驟是形成重組DNA分子,噬菌體可在基因工程中作為目的基因的載體。 7.(2018全國(guó)卷Ⅲ,12,12分)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國(guó)科學(xué)家率先成功

13、地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問(wèn)題: (1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過(guò)程,核移植是指　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。通過(guò)核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目　　　　(填“減半”“加倍”或“不變”)。? (2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度　　　　(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? (3)在哺乳動(dòng)物核移植的過(guò)程中,若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作

14、為核供體,通常,所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目　　　　(填“相同”或“不同”),性染色體組合　　　　(填“相同”或“不同”)。? 答案　(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞　不變　(2)小于　胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對(duì)容易　(3)相同　不同 解析　(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,并最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)等于重組細(xì)胞中的染色體數(shù),等于供核細(xì)胞中的染色體數(shù)。(2)哺乳動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對(duì)容易,而哺乳動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性十分困難,因此,動(dòng)物

15、體細(xì)胞核移植獲得克隆猴的難度也就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。(3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞中常染色體數(shù)目相同,雌性性染色體組合為XX,雄性性染色體組合為XY,因此題中所得的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不同。 B組　能力提升 1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(　　) A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 答案　D　由于接觸抑制,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中,由于所有子代細(xì)

16、胞來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞,所以基因型一般都相同,B項(xiàng)錯(cuò)誤;二倍體細(xì)胞通常為有限細(xì)胞系,傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的,C項(xiàng)錯(cuò)誤;惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有癌變的特點(diǎn),可進(jìn)行傳代培養(yǎng),D項(xiàng)正確。 2.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物克隆的說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　) A.植物組培獲得的試管苗,可能為雜合子,也可能為純合子;可能為單倍體,也可能為二倍體 B.同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)組培獲得的愈傷組織基因型一定相同 C.動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng) D.為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素 答案　B　植物組培屬于無(wú)性繁殖,獲得的試管苗細(xì)胞內(nèi)基因型和染色體組成取決于外植體

17、,A正確;同一株綠色開(kāi)花植物的體細(xì)胞和生殖細(xì)胞經(jīng)組培獲得的愈傷組織基因型不同,B錯(cuò)誤;動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng),為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,C、D正確。 3.對(duì)于下面制備單克隆抗體過(guò)程示意圖,不正確的敘述是(　　) A.①表示已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B.②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇介導(dǎo) C.④中的篩選是通過(guò)抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的 D.⑤可以無(wú)限增殖 答案　A　已免疫的B淋巴細(xì)胞可以從小鼠的脾臟中提取,也可以從血漿中提取,骨髓瘤細(xì)胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融

18、合形成的雜交瘤細(xì)胞獲得的,動(dòng)物細(xì)胞融合可以用化學(xué)方法——聚乙二醇,生物方法——滅活病毒等。如果要篩選能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群,可以通過(guò)抗原—抗體反應(yīng)。融合細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。 4.下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)圖中①、②所示的結(jié)構(gòu)分別是　　　　、　　　　。? (2)圖中③、④所示的生物工程技術(shù)分別是　　　　　　、　　　　　　　。? (3)過(guò)程③通常用去核卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作,含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因?yàn)樗　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　? (4)

19、過(guò)程④通常采用的方法是　　　　　　　　。? (5)過(guò)程④的完成需要用到的非酶基因操作工具為　　　　　　　。? (6)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是　　　　　　　　　　　　　。? 答案　(1)細(xì)胞核　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　(2)(體細(xì)胞)核移植技術(shù)　基因工程(轉(zhuǎn)基因技術(shù)或DNA重組技術(shù))　(3)含有促進(jìn)(或激活)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)　(4)顯微注射法　(5)載體 (6)不發(fā)生免疫排斥反應(yīng) 解析　(1)體細(xì)胞核移植利用體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,其中導(dǎo)入健康胰島B細(xì)胞基因,可以形成能正常分泌胰島素的胰島B細(xì)胞群。(2)圖中③是將體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵細(xì)胞重組

20、為一個(gè)細(xì)胞,為體細(xì)胞核移植技術(shù)。圖中④是將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)胧荏w細(xì)胞,為基因工程技術(shù)。(3)過(guò)程③通常用去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞,除了因?yàn)樗w積大,易操作,含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因?yàn)槠浜心軌蚣せ罴?xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(4)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞通常用顯微注射法。(5)基因工程的基本工具為限制酶、DNA連接酶、載體,載體為非酶基因操作工具,通常為質(zhì)粒。(6)圖示方法與一般的異體移植相比可避免免疫排斥。 5.下圖表示細(xì)胞工程的流程圖(a、b表示過(guò)程),請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題: (1)若圖示為動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程,則a特有的誘導(dǎo)劑是　　　　　　　　　。以動(dòng)物細(xì)胞融合為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)

21、為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑,通過(guò)把能產(chǎn)生抗體的　　　　　　細(xì)胞與能在體外大量增殖的　　　　　　細(xì)胞進(jìn)行融合,得到既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞。? (2)若圖示為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程,則在甲、乙融合之前,需要用　　　　　　　　　　(填工具酶)制備　　　　　　。這項(xiàng)工程的意義是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? (3)由甲乙融合得到丙細(xì)胞的基本原理是　　　　　　　　　　　　　　。? 答案　(1)滅活的病毒　B淋巴(漿)　骨髓瘤　(2)纖維素酶和果膠酶　原生質(zhì)體　克服有性雜交遠(yuǎn)緣不親和障礙,擴(kuò)大親本組合的范圍　(3)細(xì)胞膜的流動(dòng)性 解析　(1)若a是誘導(dǎo)動(dòng)

22、物細(xì)胞融合,則特有的誘導(dǎo)劑是滅活的病毒。在單克隆抗體的制備過(guò)程中,利用已免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞既可以迅速大量增殖,又可以產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體。(2)在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,需要對(duì)甲乙細(xì)胞先用纖維素酶和果膠酶去壁,然后再誘導(dǎo)甲乙的原生質(zhì)體融合。該技術(shù)可以克服有性雜交遠(yuǎn)緣不親和障礙,擴(kuò)大親本組合的范圍。(3)甲乙細(xì)胞融合形成丙細(xì)胞,利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 6.“生物導(dǎo)彈”可用于殺死人類(lèi)某些癌細(xì)胞。制備“生物導(dǎo)彈”是單克隆抗體的重要應(yīng)用之一,其過(guò)程如圖所示: (1)在①~⑤批量生產(chǎn)A蛋白抗原的過(guò)程中,要快速獲得大量的A基因可采用　　　　技術(shù)。在該技術(shù)中,解旋的方法是　

23、　　　　　　;過(guò)程③所用的方法是　　　　　　;④過(guò)程一般選擇發(fā)育良好的　　　　　　　　　　　　　　　　,移植到受體牛的子宮中。? (2)在⑥~⑨批量生產(chǎn)“生物導(dǎo)彈”的過(guò)程中,⑦過(guò)程所用的“脾臟中的細(xì)胞”為　　　　　　　　　　　　　。⑦過(guò)程區(qū)別于植物體細(xì)胞雜交技術(shù)所特有的誘導(dǎo)因素是　　　　　　　　,要得到所需的雜交瘤細(xì)胞要經(jīng)過(guò)　　　　次篩選,最終篩選出的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是　　　　　　　　　　　　　　　　。? 答案　(1)PCR　高溫處理　顯微注射法　桑椹胚或囊胚 (2)已免疫的B細(xì)胞(或漿細(xì)胞)　滅活的病毒　2　既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一(或特異)抗體 解析　據(jù)圖分析可知,①表示目的

24、基因的獲取,②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建,③表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,④表示早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植,⑤表示用轉(zhuǎn)基因牛大量生產(chǎn)A蛋白質(zhì),⑥表示將抗原注入小鼠體內(nèi),⑦表示已免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,⑧表示篩選、檢測(cè)并獲得大量所需要的雜交瘤細(xì)胞,最終獲得單克隆抗體,⑨表示把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合,制成“生物導(dǎo)彈”。(1)通常采用PCR技術(shù)快速獲得大量的目的基因;DNA分子受熱變性后可解鏈為單鏈,所以在PCR技術(shù)中,用高溫處理的方法進(jìn)行解旋;將目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵,常用的方法是顯微注射法;胚胎移植過(guò)程中,一般選擇發(fā)育良好的桑椹胚或囊胚,移植到受體牛的子宮中。

25、(2)將抗原注射到小鼠體內(nèi),小鼠會(huì)產(chǎn)生體液免疫反應(yīng),在該小鼠的脾臟中會(huì)出現(xiàn)一些能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的已免疫的B細(xì)胞(或漿細(xì)胞),設(shè)法將這些細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,和進(jìn)一步的克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),最終會(huì)得到既能迅速大量繁殖、又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞,進(jìn)而制備單克隆抗體。因此⑦過(guò)程所用的“脾臟中的細(xì)胞”為已免疫的B細(xì)胞(或漿細(xì)胞);動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程區(qū)別于植物體細(xì)胞雜交技術(shù)所特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒;要得到所需的雜交瘤細(xì)胞要經(jīng)過(guò)2次篩選。 7.苦蕎富含黃酮類(lèi)化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在降血糖、降血脂等方面功效顯著。查爾酮合成酶(CHS) 是黃酮類(lèi)化合物合成的關(guān)鍵酶,如圖為

26、將CHS基因?qū)肟嗍w,培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖。 (1)基因工程的核心是　　　　　　　　　　　　。? (2)可利用　　　　　　　　、　　　　　　　方法獲取CHS基因。? (3)過(guò)程①中切開(kāi)質(zhì)粒的酶是　　　　　。它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是　　　　　　　　　　。 ? (4)過(guò)程②③分別是　　　　　　　　　?？嗍w細(xì)胞能被培養(yǎng)成植株的根本原因是　　　　　　　　　　　　　。 ? (5)為培育轉(zhuǎn)基因苦蕎植株,還可將該植物幼葉消毒后,用　　　　　　　　　　酶混合液處理,獲得原生質(zhì)體。酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,其作用是　　　　　　。將目的基因?qū)朐|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò)

27、　　　　得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成　　　　,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得該轉(zhuǎn)基因植株。 ? (6)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,下列原因錯(cuò)誤的是　　　　。(填選項(xiàng)編號(hào))? A.愈傷組織發(fā)生遺傳變異 B.愈傷組織不能分散成單細(xì)胞 C.愈傷組織中激素平衡發(fā)生改變 D.愈傷組織對(duì)外源激素敏感性發(fā)生改變 答案　(1)構(gòu)建重組DNA分子　(2)從基因文庫(kù)獲取、化學(xué)方法合成、PCR合成(任答兩項(xiàng)即可)　(3)限制性核酸內(nèi)切酶 能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子　(4)脫分化、再分化　植物細(xì)胞的全能性(細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部基因)　(5)纖維素酶和果膠(寫(xiě)全

28、才得分)　維持滲透壓　液體懸浮培養(yǎng)　胚狀體　(6)B 解析　(1)基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體(即重組DNA分子)。(2)獲取目的基因的方法有:從基因文庫(kù)獲取、化學(xué)方法合成、PCR合成。(3)過(guò)程①中切開(kāi)質(zhì)粒的酶是限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶),它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是限制酶能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割雙鏈DNA分子。(4)過(guò)程②是脫分化形成愈傷組織,過(guò)程③是再分化形成試管苗。苦蕎細(xì)胞能被培養(yǎng)成植株的根本原因是植物細(xì)胞的全能性(細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部基因)。(5)由植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體,需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。處理過(guò)程中酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,其作用是維持滲透壓,防止原生質(zhì)體過(guò)度吸水或者失水死亡。將目的基因?qū)朐|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成胚狀體,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得該轉(zhuǎn)基因植株。(6)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,可能的原因有愈傷組織發(fā)生遺傳變異,愈傷組織中激素平衡發(fā)生改變,愈傷組織對(duì)外源激素敏感性發(fā)生改變等,所以本題選B。 10