2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)40 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用

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1、2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)40 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用 1．[xx·上海高考]下圖表示四種微生物培養(yǎng)物(①～④)在添加利福平前后的細(xì)胞內(nèi)RNA含量。由此可以判斷古細(xì)菌和酵母菌可能是(　　) A．①②　 B．①④ C．②③　 D．③④ 解析：利福平抑制細(xì)菌RNA的合成，使DNA和蛋白質(zhì)合成停止，只能作用于細(xì)菌。而古細(xì)菌是一類(lèi)很特殊的細(xì)菌，核糖體對(duì)氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核細(xì)胞的相似，其復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯接近真核生物；利福平也對(duì)酵母菌等真核生物無(wú)效，所以加利福平前后，古細(xì)菌和酵母菌中的RNA變化不大。 答案：B 2．[xx·課標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ]為了調(diào)查某河流的水

2、質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_____________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 (2)該小組采用平板劃線(xiàn)法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌，在第二次及以后的劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)。這樣做

3、的目的是_______________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______________的利用率。 解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌

4、是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀(guān)察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù)： ×M(×稀釋倍數(shù))＝×100＝3.8×107/L。 (2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，這樣做的目的是：通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。 (3)由題圖可知B圖為平板劃線(xiàn)法接種的結(jié)果(菌落相對(duì)均勻分布)。 (4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。 答案：(1)檢

5、測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B (4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 3．[xx·課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ]植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌

6、落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表)： 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是___________________________________________

7、____ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，如下圖： (2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 (3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，且需以纖維素為唯一碳源。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖 (2)紅　透明圈 (3

8、)不能　液體培養(yǎng)基不能分離單菌落　不能　乙培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR－纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 4．[xx·四川高考]有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、________四類(lèi)，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是__________________________________。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和________

9、，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成________保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線(xiàn)工具是________。劃線(xiàn)的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)上都不間斷地長(zhǎng)滿(mǎn)了菌，第二劃線(xiàn)區(qū)域所劃的第一條線(xiàn)上無(wú)菌落，其它劃線(xiàn)上有菌落。造成劃線(xiàn)無(wú)菌落可能的操作失誤有______________________ ________________________________________________________________________。 (4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是____________________

10、____________________，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？________________________________________________________________________。 解析：(1)微生物生長(zhǎng)所需要的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)樗辉试S特定的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 (2)植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。MS培養(yǎng)基的成分一般先分別配制成母液備用。 (3)平板劃線(xiàn)法接種時(shí)常使用接種環(huán)劃線(xiàn)。第二區(qū)域只有第一條線(xiàn)無(wú)菌落，而其他的劃線(xiàn)卻有菌落，很可能是因?yàn)榻臃N環(huán)

11、在灼燒后未冷卻，第一次劃線(xiàn)時(shí)將菌種燙死，而后接種環(huán)冷卻，能正常劃線(xiàn)，也可能是第一次劃線(xiàn)時(shí)劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始，使接種環(huán)上無(wú)菌種。 (4)題中實(shí)驗(yàn)為取得菌種培養(yǎng)液過(guò)濾后離心上清液，加入蛋白酶處理后，測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率。意為假設(shè)菌種能產(chǎn)生降解苯磺隆的蛋白質(zhì)類(lèi)酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設(shè)成立。但由于缺乏空白對(duì)照，不能比較蛋白酶的處理是否能降低苯磺隆降解率，該實(shí)驗(yàn)不能得出相應(yīng)結(jié)論。 答案：(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽　只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖 (2)細(xì)胞分裂素　母液 (3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始 (4)目的菌株能

12、分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)　不合理，缺少空白對(duì)照 1．[xx·廣東珠海一模]下列有關(guān)培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述不正確的是(　　) A．植物組織培養(yǎng)常用的是固體培養(yǎng)基 B．可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來(lái)判斷和鑒別細(xì)菌的類(lèi)型 C．利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌 D．在無(wú)氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌 解析：在只以尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。 答案：D 2．[xx·浙江金華模擬]下列對(duì)滅菌和消毒的理解不正確的是(　　) A．滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子 B．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是完全相同的 C．接種環(huán)用灼燒法滅菌

13、 D．常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法 解析：消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 答案：B 3．[xx·安徽淮南期末]用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基　②都需要使用接種針進(jìn)行接種 ③都需要在火焰旁進(jìn)行接種?、芏伎梢杂脕?lái)計(jì)數(shù)活菌 A．①②　　 B．③④ C．①③　　 D．②④ 解析：平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故①正確；平板劃線(xiàn)法采用接種環(huán)進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器

14、進(jìn)行操作，故②錯(cuò)誤；純化時(shí)，要進(jìn)行無(wú)菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故③正確；平板劃線(xiàn)法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)，故④項(xiàng)錯(cuò)誤。 答案：C 4．[xx·北京市東城區(qū)聯(lián)考]細(xì)菌需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列與此有關(guān)的說(shuō)法正確的是(　　) A．乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源是相同的 B．氮源不可能作為細(xì)菌的能源物質(zhì) C．瓊脂是細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖中不可缺少的一種物質(zhì) D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的不都是尿素分解菌 解析：乳酸菌是異養(yǎng)型微生物，硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物，所利用的碳源是不同的，A錯(cuò)誤。硝化細(xì)菌的能源來(lái)自NH3氧化釋放的能量，B

15、錯(cuò)誤。瓊脂不是細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖中必需的物質(zhì)，C錯(cuò)誤。 答案：D 5．[xx·武昌調(diào)研]高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌。其篩選過(guò)程如下圖所示。 據(jù)圖中信息并結(jié)合課本知識(shí)回答： (1)進(jìn)行①過(guò)程的目的是__________________；②過(guò)程所使用的接種方法是__________________。 (2)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基應(yīng)屬于______________培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入________________作為凝固劑。 (3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)

16、pH的先后順序是________________；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基應(yīng)采用______________進(jìn)行滅菌。 (4)部分嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放_(tái)_______分解培養(yǎng)基中的淀粉，在不同菌落周?chē)纬纱笮〔煌耐该魅Γ瑧?yīng)挑出________的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記和理解應(yīng)用能力。(1)過(guò)程①稱(chēng)為稀釋?zhuān)康氖窍♂屖葻峋囵B(yǎng)液；過(guò)程②將嗜熱菌接種到Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中，所用的接種方法是稀釋涂布平板法。(2)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基應(yīng)屬于選擇培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑，培養(yǎng)基呈固態(tài)。

17、(3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基在配制和滅菌時(shí)，先調(diào)節(jié)pH，后滅菌；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。(4)部分嗜熱菌可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，透明圈大的菌落，說(shuō)明嗜熱菌的降解淀粉能力強(qiáng)，可挑選出來(lái)接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基。 答案：(1)稀釋(嗜熱菌培養(yǎng)液)　稀釋涂布平板法 (2)選擇　瓊脂 (3)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌　高壓蒸汽滅菌法 (4)淀粉酶　透明圈大 6．[xx·江蘇南通期末]烹飪產(chǎn)生的油煙冷卻后形成液態(tài)的油脂，傾入下水道后會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染?？蒲腥藛T通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選出了能高效分解油脂的微生物。請(qǐng)分析回答： 實(shí)驗(yàn)材料：烹飪油煙冷凝液、菌液a、b、c、人工配制的營(yíng)養(yǎng)液等。 (1)據(jù)

18、下圖曲線(xiàn)分析可知________菌液最適合在實(shí)際工程中應(yīng)用，原因是______________________。 (2)用下列固體培養(yǎng)基：葡萄糖、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O，來(lái)篩選分解尿素的細(xì)菌，還應(yīng)加入的物質(zhì)是________________。 (3)下圖接種微生物的方法是__________________，目的是______________________________________。 (4)四位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量。在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是________。

19、 A．一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是23 B．兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是22和26，取平均值24 C．三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26 D．四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25 (5)用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量往往比測(cè)得的數(shù)量________，因?yàn)開(kāi)_______________________________________________________________________。 (6)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2 mL)

20、________。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記和理解應(yīng)用能力。(1)分析圖中的三條曲線(xiàn)，隨培育時(shí)間的延長(zhǎng)，油的濃度均在下降，但菌液c在3天內(nèi)下降的最快，且油污的濃度也是最低的。 (2)要篩選出能分解尿素的細(xì)菌，其培養(yǎng)基中要加入一定量的尿素，配制成選擇培養(yǎng)基。 (3)圖示中的操作者將接種環(huán)在酒精燈灼燒后進(jìn)行接種，同時(shí)在培養(yǎng)皿中劃出規(guī)則的圖形，培養(yǎng)一段時(shí)間后。在培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)出的后代就是單個(gè)細(xì)胞(純培養(yǎng)物——菌落)。 (4)統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí)，要至少涂布3個(gè)平板作重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。 (5)用稀釋涂布平板法測(cè)定菌落的密度，實(shí)際

21、活菌數(shù)量往往比測(cè)得的數(shù)量多，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察的是一個(gè)菌落。 (6)若涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2 mL，則在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是(23.4/0.2)×104＝1.17×106。 答案：(1)c　油濃度在3天內(nèi)迅速下降 (2)尿素 (3)平板劃線(xiàn)　分離(純化)單個(gè)細(xì)胞形成的菌落 (4)D (5)多　當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察的是一個(gè)菌落 (6)1.17×106 7．[xx·湖北荊門(mén)調(diào)研]從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定。富集

22、培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。 (1)接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行____________處理。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過(guò)程中，一定要注意在____________條件下進(jìn)行。 (2)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從____________環(huán)境中采集。 (3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制____________培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的____________。 (4)經(jīng)過(guò)梯度稀釋后，要將樣品均勻

23、涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是____________，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周?chē)欠癞a(chǎn)生____________來(lái)篩選纖維素分解菌。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_________________________________________。 解析：本題主要考查微生物培養(yǎng)等有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記和理解應(yīng)用能力。(1)微生物的培養(yǎng)方法：接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過(guò)程中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行。 (2)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)

24、境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從富含纖維素環(huán)境中采集。 (3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的碳源。 (4)經(jīng)過(guò)梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是剛果紅，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周?chē)欠癞a(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高。 答案：(1)高壓蒸汽滅菌　無(wú)菌 (2)富含纖維素 (3)選擇　碳源 (4)剛果紅　透明圈　菌液濃度過(guò)高(土壤溶液稀釋不夠) 8．[xx·

25、河南開(kāi)封質(zhì)檢]一種廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)物)在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。 (1)制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理?，F(xiàn)有一升土壤浸出液，用無(wú)菌吸管吸取1 mL液樣至盛有9 mL無(wú)菌水的試管中，依次稀釋到103倍稀釋度。各取0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為_(kāi)_______。 (2)要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從用途方

26、面來(lái)看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是__________________________。 (3)接種技術(shù)的核心是______________________________。在劃線(xiàn)接種時(shí)，連續(xù)劃線(xiàn)的目的是將聚集的菌種逐步________________，培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是__________________或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。 (4)在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無(wú)透明帶菌落利用的氮源主要是____________，有透明帶菌落利用的氮源主要是____________，據(jù)此可篩選出目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖顯示的A～E五種菌株中，____

27、________是最理想菌株。 (5)科研人員用放射線(xiàn)處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A和B，然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示： 接種的菌種 一般培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果 A 不生長(zhǎng) 添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng) B 不生長(zhǎng) 添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng) A＋B 能生長(zhǎng) 不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng) 突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的原因是__________________________。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是_______________________。 解析：(1)0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三種培養(yǎng)基上培養(yǎng)

28、，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則菌落數(shù)的平均值是56，所以每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)＝56÷0.1×103×103＝5.6×108。 (2)因?yàn)樵摮輨┖?，所用的培養(yǎng)基用除草劑為唯一氮源有利于篩選目的菌。 (3)接種過(guò)程中要防止其他雜菌的污染，以保證培養(yǎng)的目的菌的純度，劃線(xiàn)接種時(shí)，連續(xù)劃線(xiàn)的目的是使單個(gè)細(xì)菌分離，以獲得單個(gè)菌落，由于該培養(yǎng)基是選擇用除草劑作氮源的細(xì)菌，所以大多數(shù)細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能繁殖或是厭氧菌受氧的抑制。 (4)培養(yǎng)基上形成的菌落有的有透明帶，有的無(wú)透明帶，有透明帶的是因?yàn)榧?xì)菌利用了培養(yǎng)基中的成分即除草劑，無(wú)透明帶的細(xì)菌則利用的是大氣中的氮?dú)鉃榈?。圖中E透明

29、帶最大，說(shuō)明該菌落分解除草劑的能力最強(qiáng)。 (5)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明突變株A、B在一般培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，最主要的原因可能是分別缺乏合成物質(zhì)甲、乙的酶，兩者混合培養(yǎng)都能生長(zhǎng)說(shuō)明突變株A、B生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)甲、乙正好可以分別由B、A產(chǎn)生。 答案：(1)5.6×108 (2)在無(wú)氮培養(yǎng)基中添加了該除草劑 (3)防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度　稀釋獲得單個(gè)菌落　培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源 (4)氮?dú)狻≡摮輨 (5)突變株A缺乏合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶　突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供。 1．生活飲用水已經(jīng)過(guò)沉淀、過(guò)濾、加氯消毒

30、等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB5749 — 85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，總大腸菌群不得大于3個(gè)/L。 (1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊乃畼佑猛坎计鞣謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱(chēng)為_(kāi)_____________。 (2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？為什么？________

31、________________________。 (3)如分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為11、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_(kāi)_________________。 (4)純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用____________法滅菌，________(可/不可)用加入抗生素的方法防止雜菌感染。 (5)如果要測(cè)定水中的病毒種類(lèi)，可以用________技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用________技術(shù)進(jìn)行鑒定。 解析：(1)題述方法中有系列稀釋、涂布平板等操作，是稀釋涂布平板法。(2)

32、由于種種原因，培養(yǎng)基在配制過(guò)程中可能受到污染，要判斷培養(yǎng)基是否受到污染，需要設(shè)置空白對(duì)照組。(3)計(jì)數(shù)時(shí)，選用菌落數(shù)在30～300的平板，平均菌落數(shù)為161，所以1升原水樣中大腸桿菌活菌數(shù)為1.61×108。(4)培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，細(xì)菌對(duì)抗生素敏感，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染。(6)PCR技術(shù)可用于DNA體外擴(kuò)增，DNA分子雜交可用于核酸類(lèi)型的鑒定。 答案：(1)稀釋涂布平板法 (2)需要，因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被污染 (3)1.61×108 (4)高壓蒸汽滅菌　不可 (5)PCR　DNA分子雜交 2．為了應(yīng)對(duì)石油危機(jī)并減緩環(huán)境污染，研究和使用糧食秸稈生產(chǎn)燃料

33、乙醇作為替代燃料已成為當(dāng)前的一個(gè)熱點(diǎn)。已知秸桿的主要成分是纖維素，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)人們首先利用纖維素分解菌分解纖維素，纖維素分解菌應(yīng)取自________的土壤中。纖維素分解菌所含的纖維素酶是一種復(fù)合物，一般包括三種成分，C1酶、Cx酶和________酶，后者能將纖維二糖分解成葡萄糖。 (2)從土壤中篩選的纖維素分解菌需要配制________培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入________作為唯一碳源。為了觀(guān)察和統(tǒng)計(jì)菌落，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入________，從物理性質(zhì)看，這屬于________培養(yǎng)基。 (3)經(jīng)過(guò)梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)中需要加入

34、的特殊染料是________，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周?chē)欠癞a(chǎn)生________來(lái)篩選纖維素分解菌。 (4)產(chǎn)生葡萄糖后需要利用酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精，可使用________檢測(cè)產(chǎn)物是否為酒精，該試劑在酸性條件下可遇酒精反應(yīng)，溶液成________色。 解析：(1)富含纖維素的土壤中，含有更多的纖維素分解菌，纖維素酶中的葡萄糖苷酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)篩選纖維素分解菌需要用選擇培養(yǎng)基，限制纖維素作為唯一碳源，只有加入纖維素分解菌能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。觀(guān)察統(tǒng)計(jì)菌落需要加入了瓊脂的固體培養(yǎng)基。(3)鑒別纖維素分解菌需要加入剛果紅溶液，選擇周?chē)该魅Υ蟮木洹?4)利用重鉻酸鉀來(lái)鑒別酒精，酸性條件下它與酒精反應(yīng)呈灰綠色。 答案：(1)富含纖維素　葡萄糖苷 (2)選擇　纖維素　瓊脂　固體 (3)剛果紅　透明圈 (4)重鉻酸鉀　灰綠