優(yōu)化探究高考生物一輪復習 第十二單元 生物技術實踐 第二講 微生物的培養(yǎng)與應用課件 新人教版
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1、第二講微生物的培養(yǎng)與應用第二講微生物的培養(yǎng)與應用營養(yǎng)物質營養(yǎng)物質 生長繁殖生長繁殖 無機鹽無機鹽 碳碳 氮氮 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 鑒別鑒別 稱量稱量 滅菌滅菌 倒平板倒平板 消毒和滅菌消毒和滅菌 酒精酒精 灼燒灼燒 高壓蒸汽高壓蒸汽 無菌無菌 50 連續(xù)劃線連續(xù)劃線 菌落菌落 抑制或阻止抑制或阻止 菌落數(shù)菌落數(shù) 尿素尿素 酚紅酚紅 剛果紅剛果紅 透明圈透明圈 纖維素纖維素 纖維二糖和葡萄糖纖維二糖和葡萄糖 富含纖維素富含纖維素 增加纖維素菌濃度,以確保能夠從樣品中分離到所增加纖維素菌濃度,以確保能夠從樣品中分離到所 需要的微生物需要的微生物 產生透明圈產生透明圈 方法方法先培養(yǎng)微生物,再加入
2、剛果先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應紅進行顏色反應在倒平板時就加入剛在倒平板時就加入剛果紅果紅過程過程培養(yǎng)基長出菌落培養(yǎng)基長出菌落覆蓋覆蓋CR溶溶液液(質量濃度為質量濃度為1 mg/mL) 倒去倒去CR溶液溶液加加入入NaCl溶液溶液(物質的量濃度為物質的量濃度為1 mol/L) 倒掉倒掉NaCl溶液溶液產生透明圈產生透明圈配制配制CR溶液溶液(質量濃度質量濃度為為10 mg/mL)滅菌滅菌按照按照1 mL CR溶液溶液/200 mL培養(yǎng)基比例混培養(yǎng)基比例混勻勻倒平板倒平板培養(yǎng)培養(yǎng)透明圈透明圈優(yōu)點優(yōu)點顯示出的顏色反應基本上是顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用纖維素分解菌的作用操作
3、簡便,不存在菌操作簡便,不存在菌落的混雜問題落的混雜問題考點一微生物的培養(yǎng)基及其應用考點一考點二考點三營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能碳源碳源無機無機碳源碳源有機有機碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機物等含碳無機物糖類、脂質、蛋白質、有糖類、脂質、蛋白質、有機酸、石油、花生粉餅等機酸、石油、花生粉餅等構成細胞中的物構成細胞中的物質和一些代謝產物質和一些代謝產物有些既是碳源又有些既是碳源又是能源是能源考點一考點一考點二考點三營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能氮源氮源無機無機氮源氮源有機有機氮源氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、銨鹽、硝酸鹽、N2等等將無機氮合成含氮的將無機氮合成含氮的代謝產
4、物代謝產物生長因子生長因子牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸尿素、氨基酸合成蛋白質、核酸及含合成蛋白質、核酸及含氮的代謝產物氮的代謝產物維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分酶和核酸的組成成分參與代謝過程中的酶參與代謝過程中的酶促反應促反應考點一考點一考點二考點三劃分劃分標準標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點應用應用物理物理性質性質液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產工業(yè)生產半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑(如瓊脂如瓊脂)觀察微生物的運動、觀察微生物的運動、分類鑒定分類鑒定微生物的分離、鑒定、微生物的分離、鑒定、活
5、菌計數(shù)、菌種保藏活菌計數(shù)、菌種保藏考點一考點一考點二考點三劃分劃分標準標準培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類特點特點應用應用用途用途選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基鑒別培鑒別培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制化學物質,以抑制不需要的微生物的不需要的微生物的生長,促進所需的生長,促進所需的微生物的生長微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物培養(yǎng)、分離出特定微生物(如如培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素;以尿素養(yǎng)基中加入青霉素;以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細菌離分解尿素的細菌)根據(jù)微生物的代謝根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中特點,在培養(yǎng)基
6、中加入某種指示劑或加入某種指示劑或化學藥品化學藥品鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類的微生物(如如可用伊紅可用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌腸桿菌)考點一考點一考點二考點三劃分標準劃分標準化學成分化學成分培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點應用應用天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基含化學成分不明確的天含化學成分不明確的天然物質然物質培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確(用化用化學成分已知的化學物學成分已知的化學物質配成質配成)工業(yè)生產工業(yè)生產分類、鑒別分類、鑒別考點一考點一考點二考點三考點一考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點一考點
7、一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點一考點一考點二考點三牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨NaCl瓊脂瓊脂蒸餾水蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至定容至1 000 mL 解析解析 試題試題 答案答案 考點一考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點二微生物的培養(yǎng)考點一考點二考點三考點二考點一考點二考點三方法方法平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法操作操作過程過程平板劃線法中細胞的分平板劃線法中細胞的分離和稀釋過程發(fā)生在接離和稀釋過程發(fā)生在接種環(huán)在固體平板表面上種環(huán)在固體平板表面上的劃線和移動過程中。的劃線和移動過程中。在線的開始部分,微生在線的
8、開始部分,微生物往往連在一起生長,物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌體數(shù)隨著線的延伸,菌體數(shù)逐漸減少,最后可能形逐漸減少,最后可能形成純種的單個菌落成純種的單個菌落將分別盛有將分別盛有9 mL水的水的6支試管滅菌,支試管滅菌,并按并按101106的順序編號;的順序編號;用移液管吸取用移液管吸取1 mL培養(yǎng)的菌液,注培養(yǎng)的菌液,注入入101倍稀釋的試管中。用手指輕壓移倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭,吹吸液管上的橡皮頭,吹吸3次,使菌液與次,使菌液與水充分混勻;水充分混勻;從從101倍稀釋的試管中吸取倍稀釋的試管中吸取1 mL稀釋稀釋液,注入液,注入102倍稀釋的試管中,重復倍稀釋的
9、試管中,重復步混勻操作。依次類推,直到完成最步混勻操作。依次類推,直到完成最后后1支試管的稀釋支試管的稀釋考點二考點一考點二考點三方法方法注意注意事項事項接種環(huán)的灼燒接種環(huán)的灼燒a.第一次劃線前:殺死接種環(huán)上的微第一次劃線前:殺死接種環(huán)上的微生物,避免污染培養(yǎng)物;生物,避免污染培養(yǎng)物;b.每次劃線前:殺死殘留菌種,保證每次劃線前:殺死殘留菌種,保證每次劃線菌種來自上一次劃線末端;每次劃線菌種來自上一次劃線末端;c.劃線結束后:殺死殘留菌種,避免劃線結束后:殺死殘留菌種,避免污染環(huán)境和感染操作者污染環(huán)境和感染操作者灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后再進行灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后再進行操作,以免溫度太高殺死
10、菌種;操作,以免溫度太高殺死菌種;劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連;相連;劃線用力要大小適當,防止用力過劃線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破大將培養(yǎng)基劃破稀釋操作時:每支試管及其中的稀釋操作時:每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌;操作水、移液管等均需滅菌;操作時,試管口和移液管應在離火焰時,試管口和移液管應在離火焰12 cm處處涂布平板時:涂布平板時:a.涂布器用體積分數(shù)為涂布器用體積分數(shù)為70%的酒精消的酒精消毒,取出時,讓多余酒精在燒杯中滴毒,取出時,讓多余酒精在燒杯中滴盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈
11、火焰上引燃;酒精燈火焰上引燃;b.不要將過熱的涂布器放在盛放酒精不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精;的燒杯中,以免引燃其中的酒精;c.酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適,移液管酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適,移液管管頭不要接觸任何物體管頭不要接觸任何物體平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法考點二考點一考點二考點三方法方法目的目的平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法培養(yǎng)培養(yǎng)在培養(yǎng)基上形成由單個菌種繁殖而來的子細胞群體在培養(yǎng)基上形成由單個菌種繁殖而來的子細胞群體菌落菌落平板冷凝后倒置培養(yǎng),使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮平板冷凝后倒置培養(yǎng),使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),防
12、止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染發(fā),防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染考點二考點一考點二考點三條件條件結果結果常用方法常用方法應用范圍應用范圍消毒消毒滅菌滅菌較為溫較為溫和的物和的物理或化理或化學方法學方法強烈的理強烈的理化因素化因素僅殺死物體表面僅殺死物體表面或內部的部分微或內部的部分微生物生物(不包括芽孢不包括芽孢和孢子和孢子)殺死物體內外所殺死物體內外所有的微生物有的微生物(包括包括芽孢和孢子芽孢和孢子)煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化學藥劑消毒法化學藥劑消毒法日常用品日常用品不耐高溫的液體不耐高溫的液體用酒精擦拭雙手,用用酒精擦拭雙手,用氯氣消毒水源氯氣消毒水源接種工具接種工具灼
13、燒滅菌法灼燒滅菌法干熱滅菌法干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具玻璃器皿、金屬工具培養(yǎng)基及相關容器培養(yǎng)基及相關容器高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌法考點二考點一考點二考點三考點二考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點二考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點三微生物的純化培養(yǎng)技術與篩選計數(shù)考點一考點二土壤土壤采樣采樣選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)土壤中尿素分解菌土壤中尿素分解菌的分離實驗的分離實驗土壤中纖維素分解菌的分離實驗土壤中纖維素分解菌的分離實驗采集的土壤應該選擇采集的土壤應該選擇含有尿素的土壤含有尿素的土壤采集土樣應選擇富含纖維素的環(huán)境采集土樣應選擇富含纖維素的環(huán)境選擇土樣,將土樣放
14、選擇土樣,將土樣放在含有尿素作為唯一在含有尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基上進行氮源的培養(yǎng)基上進行選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)取土樣,在無菌條件下裝入錐形取土樣,在無菌條件下裝入錐形瓶,在一定條件下振蕩培養(yǎng)瓶,在一定條件下振蕩培養(yǎng)12 d,直到培養(yǎng)液混濁。選擇培養(yǎng)的目的直到培養(yǎng)液混濁。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的純度,確保是增加纖維素分解菌的純度,確保分離得到所需的微生物分離得到所需的微生物考點三考點三考點一考點二土壤中尿素分解土壤中尿素分解菌的分離實驗菌的分離實驗土壤中纖維素分土壤中纖維素分解菌的分離實驗解菌的分離實驗梯度稀釋梯度稀釋選用一定稀釋范圍的樣品選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)以保證菌落數(shù)液進行
15、培養(yǎng)以保證菌落數(shù)在在30300依次將培養(yǎng)液稀釋依次將培養(yǎng)液稀釋101到到107倍倍鑒定方法鑒定方法在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細菌,若指示劑變紅,某種細菌,若指示劑變紅,則則pH升高,說明該種菌能升高,說明該種菌能分解尿素分解尿素剛果紅染色法,即在含有纖維剛果紅染色法,即在含有纖維素的培養(yǎng)基中,加入剛果紅時,素的培養(yǎng)基中,加入剛果紅時,剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被分成紅色復合物。當纖維素被分解后,該復合物不能形成,培解后,該復合物不能形成,培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為養(yǎng)基中出
16、現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈中心的透明圈考點三考點三考點一考點二考點三考點三考點一考點二考點三考點三考點一考點二考點三考點三考點一考點二考點三對照組對照組作用作用現(xiàn)象現(xiàn)象結論結論未接種培養(yǎng)基未接種培養(yǎng)基有無雜菌污染有無雜菌污染的判斷的判斷未接種的培養(yǎng)皿中未接種的培養(yǎng)皿中無菌落生長無菌落生長未被雜菌污染未被雜菌污染接種的牛肉膏接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基篩選擇培養(yǎng)基篩選作用的確認選作用的確認牛肉膏培養(yǎng)基上的牛肉膏培養(yǎng)基上的菌落數(shù)大于選擇培菌落數(shù)大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具選擇培養(yǎng)基具有篩選作用有篩選作用考點三考點一考點二考點三考點三考點一考點二考點三 解析解
17、析 試題試題 答案答案 考點三考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點三考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考點三考點一考點二考點三 解析解析 試題試題 答案答案 考向一微生物的實驗室培養(yǎng)考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向一考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向一考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向一考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向一考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向一考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向二微生物的分離與純化考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 考向二考向一考向二 解
18、析解析 試題試題 答案答案 考向二考向一考向二 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 酵母膏酵母膏無機鹽無機鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉瓊脂瓊脂CR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案 解析解析 試題試題 答案答案
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