高考生物一輪復(fù)習(xí) 第33講 克隆技術(shù)課件

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1、第第33講克隆講克隆技術(shù)技術(shù)考點(diǎn)克隆技術(shù)考點(diǎn)克隆技術(shù)一、植物的克隆一、植物的克隆1.植物克隆植物克隆(1)技術(shù)基礎(chǔ)：技術(shù)基礎(chǔ)：(2)理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的原因：植物體的每個(gè)生原因：植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有活細(xì)胞都具有。(3)植物細(xì)胞的全能性的實(shí)現(xiàn)條件：離體；適當(dāng)?shù)闹参锛?xì)胞的全能性的實(shí)現(xiàn)條件：離體；適當(dāng)?shù)?包括水、無(wú)機(jī)鹽、包括水、無(wú)機(jī)鹽、氨基酸等、氨基酸等)；適宜條件適宜條件(、溫度、溫度、光照等、光照等)以及以及物質(zhì)。物質(zhì)。(4)植物激素的作用：誘導(dǎo)植物激素的作用：誘導(dǎo)的形成和生長(zhǎng)；誘導(dǎo)的形成和生長(zhǎng)；誘導(dǎo)和控制和控制過(guò)程。過(guò)程。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)全能性全能性完整的全套

2、遺傳物質(zhì)完整的全套遺傳物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)維生素維生素蔗糖蔗糖無(wú)菌無(wú)菌濕度濕度生長(zhǎng)調(diào)節(jié)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)愈傷組織愈傷組織再分化再分化2.植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(1)程序：程序：培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制小組織塊的切取小組織塊的切取的獲得的獲得新植株的再生。新植株的再生。(2)填寫基本操作過(guò)程圖：填寫基本操作過(guò)程圖：圖中圖中，A表示表示，B表示表示或或。半固體半固體愈傷組織愈傷組織脫分化脫分化再分化再分化愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體叢狀苗叢狀苗3.植物細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)植物細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)(1)植物細(xì)胞培養(yǎng)程序：愈傷組織植物細(xì)胞培養(yǎng)程序：愈傷組織用用進(jìn)行進(jìn)行培養(yǎng)培養(yǎng)單個(gè)胚性細(xì)胞單個(gè)胚性細(xì)胞在適宜培養(yǎng)基中培在適宜

3、培養(yǎng)基中培養(yǎng)養(yǎng)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞團(tuán)胚胚胚胚完整完整植株。植株。(2)器官發(fā)生和形態(tài)建成的實(shí)現(xiàn)：通過(guò)平衡的器官發(fā)生和形態(tài)建成的實(shí)現(xiàn)：通過(guò)平衡的進(jìn)行調(diào)控。如適量的進(jìn)行調(diào)控。如適量的和和配比，配比，可誘導(dǎo)芽的分化；適量的可誘導(dǎo)芽的分化；適量的及適當(dāng)減除其他某些及適當(dāng)減除其他某些激素，可誘導(dǎo)生根。激素，可誘導(dǎo)生根。搖床搖床液體懸浮液體懸浮球形球形心形心形胚狀體胚狀體植物激素配比植物激素配比生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素吲哚乙酸吲哚乙酸4.原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程(1)原生質(zhì)體的獲得方法：在原生質(zhì)體的獲得方法：在0.50.6 mol/L的的溶液環(huán)溶液環(huán)境境(較高滲透壓較高滲透壓)下

4、，用下，用和和混合液混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，除去處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，除去，獲得獲得的原生質(zhì)體。的原生質(zhì)體。(2)植物細(xì)胞工程的操作過(guò)程植物細(xì)胞工程的操作過(guò)程甘露醇甘露醇纖維素酶纖維素酶果膠酶果膠酶細(xì)胞壁細(xì)胞壁球形球形基因工程基因工程轉(zhuǎn)基因細(xì)胞轉(zhuǎn)基因細(xì)胞5.植物克隆技術(shù)的應(yīng)用植物克隆技術(shù)的應(yīng)用(1)實(shí)現(xiàn)工廠化的植物快速繁殖實(shí)現(xiàn)工廠化的植物快速繁殖(2)生產(chǎn)生產(chǎn)，恢復(fù)品種的性狀，恢復(fù)品種的性狀(3)生產(chǎn)重要的生產(chǎn)重要的，如藥物、色素、香料、殺，如藥物、色素、香料、殺蟲劑等蟲劑等(4)(植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程)：轉(zhuǎn)基因作物，突變體選：轉(zhuǎn)基因作物，突變體選擇

5、，單倍體育種擇，單倍體育種脫毒苗脫毒苗次生代謝產(chǎn)物次生代謝產(chǎn)物育種育種二、動(dòng)物的克隆二、動(dòng)物的克隆1.動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)(1)動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是。動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)(2)動(dòng)物動(dòng)物(成纖維成纖維)細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：胰酶消化胰酶消化原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳化培養(yǎng)傳化培養(yǎng)分瓶分瓶細(xì)胞系細(xì)胞系有限細(xì)胞系有限細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系細(xì)胞株細(xì)胞株有限細(xì)胞株有限細(xì)胞株連續(xù)細(xì)胞株連續(xù)細(xì)胞株(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需傳代的原因：細(xì)胞培養(yǎng)到一定時(shí)期，細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需傳代的原因：細(xì)胞培養(yǎng)到一定時(shí)期，細(xì)胞會(huì)因?yàn)槊芏冗^(guò)大造成會(huì)因?yàn)槊芏冗^(guò)大造成，或者

6、因?yàn)榇x消耗，或者因?yàn)榇x消耗引起引起，不能正常生長(zhǎng)。，不能正常生長(zhǎng)。(4)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的含義原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的含義原代培養(yǎng)：從原代培養(yǎng)：從取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)的過(guò)程。的過(guò)程。傳代培養(yǎng)：將傳代培養(yǎng)：將分成若干份，接種到若干份分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。接觸抑制接觸抑制營(yíng)養(yǎng)枯竭營(yíng)養(yǎng)枯竭機(jī)體機(jī)體原代培養(yǎng)細(xì)胞原代培養(yǎng)細(xì)胞2.細(xì)胞系和細(xì)胞株細(xì)胞系和細(xì)胞株(1)細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，可分為細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，可分為細(xì)胞系細(xì)胞系(惡性細(xì)胞系：具有異體致瘤性；惡性細(xì)胞系：具有異體致瘤性；

7、“良性良性”細(xì)胞系：保留接觸細(xì)胞系：保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌抑制現(xiàn)象，不致癌)和和細(xì)胞系。細(xì)胞系。(2)細(xì)胞株：通過(guò)一定的選擇或純化方法細(xì)胞株：通過(guò)一定的選擇或純化方法,從從中獲得的具有中獲得的具有的細(xì)胞?？煞譃榈募?xì)胞。可分為細(xì)胞株細(xì)胞株和和細(xì)胞株。細(xì)胞株。連續(xù)連續(xù)有限有限原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系特殊性質(zhì)特殊性質(zhì)連續(xù)連續(xù)有限有限3.克隆培養(yǎng)法克隆培養(yǎng)法(1)概念：把概念：把單細(xì)胞從群體中分離出來(lái)單獨(dú)培養(yǎng)，使之單細(xì)胞從群體中分離出來(lái)單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個(gè)新的繁衍成一個(gè)新的的技術(shù)。單抗的技術(shù)。單抗等都是應(yīng)用克隆培養(yǎng)法建立的。等都是應(yīng)用克隆培養(yǎng)法建立的。(2)基本要求：必須肯定所建成的

8、克隆來(lái)源于基本要求：必須肯定所建成的克隆來(lái)源于。(3)提高細(xì)胞克隆形成率的措施有：提高細(xì)胞克隆形成率的措施有：選擇適宜的培養(yǎng)基；選擇適宜的培養(yǎng)基；添添加加；以以支持生長(zhǎng)；支持生長(zhǎng)；刺激；刺激；使用使用；調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)。CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱一個(gè)一個(gè)細(xì)胞群體細(xì)胞群體細(xì)胞株細(xì)胞株單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞血清血清滋養(yǎng)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞激素激素pH4.動(dòng)物的克隆繁殖動(dòng)物的克隆繁殖(1)動(dòng)物難以克隆的根本動(dòng)物難以克隆的根本原因原因是是體細(xì)胞體細(xì)胞中基因中基因，細(xì)胞質(zhì)中存在細(xì)胞質(zhì)中存在。(2)細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖選擇性表達(dá)選擇性表達(dá)調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)因子營(yíng)養(yǎng)限制性營(yíng)養(yǎng)限制性融合融合八細(xì)胞八細(xì)胞胚

9、胎胚胎 移植移植同期發(fā)情同期發(fā)情(3)動(dòng)物體細(xì)胞核成功克隆的原因：去除了動(dòng)物體細(xì)胞核成功克隆的原因：去除了的限制。的限制?！岸嗬蚨嗬颉闭Q生說(shuō)明：動(dòng)物誕生說(shuō)明：動(dòng)物仍能表現(xiàn)全能仍能表現(xiàn)全能性；胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有性；胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有作用作用核基因表達(dá)核基因表達(dá)體細(xì)胞核體細(xì)胞核調(diào)控調(diào)控5.單克隆抗體單克隆抗體(1)制備過(guò)程：制備過(guò)程：(2)單克隆抗體的特點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的特點(diǎn)：、?？乖乖撬枇龉撬枇黾?xì)胞細(xì)胞單克隆單克隆抗體抗體產(chǎn)生特定抗體產(chǎn)生特定抗體雜交瘤雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)靈敏度靈敏度高高1.(201510月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)科研人員擬將已知的花色基因科研

10、人員擬將已知的花色基因(目目的基因的基因)轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中，培育新花色的矮牽牛。請(qǐng)轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中，培育新花色的矮牽牛。請(qǐng)回答：回答：將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片，在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培培養(yǎng)基養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同)上，使小葉先脫分化形成上，使小葉先脫分化形成_。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至移至_(A.LB培養(yǎng)基培養(yǎng)基B.MS

11、培養(yǎng)基適宜濃度培養(yǎng)基適宜濃度NAAC.MS培養(yǎng)基適宜濃度培養(yǎng)基適宜濃度BAD.NAA/BA小于小于1的的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基)上上生根，形成完整植株。生根，形成完整植株。解析解析組培時(shí)，先將處理后的外植體接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上，組培時(shí)，先將處理后的外植體接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上，先經(jīng)脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)生芽先經(jīng)脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)生芽形成的叢狀苗，叢狀苗經(jīng)分離后轉(zhuǎn)移至添加適宜濃度形成的叢狀苗，叢狀苗經(jīng)分離后轉(zhuǎn)移至添加適宜濃度NAA的的MS培養(yǎng)基上生根，形成完整植株。注意生根培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素培養(yǎng)基上生根，形成完整植株。注意生根培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)濃度需大于

12、細(xì)胞分裂素類。類物質(zhì)濃度需大于細(xì)胞分裂素類。答案答案愈傷組織愈傷組織B2.(20164月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)兔肝細(xì)胞中的基因兔肝細(xì)胞中的基因E編碼代謝甲醛的編碼代謝甲醛的酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提高矮牽轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提高矮牽牛對(duì)甲醛的代謝能力，請(qǐng)回答：牛對(duì)甲醛的代謝能力，請(qǐng)回答：(1)將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過(guò)程正確的是其中培養(yǎng)過(guò)程正確的是_(A.葉片在含合適濃度生長(zhǎng)素的葉片在含合適濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織B.愈

13、傷組織在含細(xì)胞分裂素和生愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽長(zhǎng)素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽C.再生的芽在細(xì)胞分裂素含再生的芽在細(xì)胞分裂素含量高的培養(yǎng)基上生根量高的培養(yǎng)基上生根D.愈傷組織在含合適濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)愈傷組織在含合適濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株)。(2)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含MS液體培養(yǎng)基和適量濃度甲液體培養(yǎng)基和適量濃度甲醛且密封的試管中，將試管置于醛且密封的試管中，將試管置于_上，進(jìn)行液體懸浮培上，進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛的含量，以判斷基因養(yǎng)。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛

14、的含量，以判斷基因E是否是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。培養(yǎng)過(guò)程中液體培養(yǎng)基的作用：在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。培養(yǎng)過(guò)程中液體培養(yǎng)基的作用：一是提供營(yíng)養(yǎng)；二是一是提供營(yíng)養(yǎng)；二是_，從而使葉片保持正常形態(tài)。，從而使葉片保持正常形態(tài)。解析解析(1)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，植物激素的濃度配比影響著在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，植物激素的濃度配比影響著脫分化和再分化過(guò)程，培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素配比較高時(shí)誘導(dǎo)愈脫分化和再分化過(guò)程，培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素配比較高時(shí)誘導(dǎo)愈傷組織生芽，培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素配比較高時(shí)誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)基中傷組織生芽，培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素配比較高時(shí)誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)基中含合適濃度配比的植物激素時(shí)再分化成再生植株。含合適濃

15、度配比的植物激素時(shí)再分化成再生植株。(2)將轉(zhuǎn)基因?qū)⑥D(zhuǎn)基因矮牽牛葉片接種在液體培養(yǎng)基上，用矮牽牛葉片接種在液體培養(yǎng)基上，用揺揺床進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可床進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可獲得單細(xì)胞獲得單細(xì)胞，若在培養(yǎng)液中加入甲醛，可以通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)基中，若在培養(yǎng)液中加入甲醛，可以通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛的含量，以判斷基因甲醛的含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。液體懸浮培養(yǎng)中用到液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基除提供營(yíng)養(yǎng)外還液體懸浮培養(yǎng)中用到液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基除提供營(yíng)養(yǎng)外還需要維持滲透壓，維持細(xì)胞的正常形態(tài)和功能。需要維持滲透壓，維持細(xì)胞的正常形態(tài)和功能。答案答案(1)B(2)搖床維

16、持滲透壓搖床維持滲透壓3.(201610月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答：培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答：(1)原生質(zhì)體的分離：在無(wú)菌條件下，取煙草無(wú)菌苗的葉片，放原生質(zhì)體的分離：在無(wú)菌條件下，取煙草無(wú)菌苗的葉片，放入含有入含有0.5 mol/L甘露醇甘露醇(維持較高滲透壓維持較高滲透壓)的的_混合液處混合液處理，經(jīng)過(guò)離心純化后獲得原生質(zhì)體。理，經(jīng)過(guò)離心純化后獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該_

17、培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、_和胚狀體，最后發(fā)和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過(guò)生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過(guò)生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是_，胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)，胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是：是：_。(A.液泡小、細(xì)胞核小液泡小、細(xì)

18、胞核小B.液泡大，細(xì)胞核大液泡大，細(xì)胞核大C.液泡大，細(xì)胞核小液泡大，細(xì)胞核小D.液泡小、細(xì)胞核大液泡小、細(xì)胞核大)(3)為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離到兩種煙草的原生質(zhì)為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過(guò)體后，通過(guò)_方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用，采用_擴(kuò)增相關(guān)基因，來(lái)鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。擴(kuò)增相關(guān)基因，來(lái)鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。解析解析(1)原生質(zhì)體取得，需要在較高滲透壓的甘露醇溶液中，將原生質(zhì)體取得，需要在較高滲透壓

19、的甘露醇溶液中，將植物細(xì)胞用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，從而得到原生植物細(xì)胞用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，從而得到原生質(zhì)體。質(zhì)體。(2)當(dāng)原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后，應(yīng)當(dāng)降低培養(yǎng)基中甘露醇當(dāng)原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后，應(yīng)當(dāng)降低培養(yǎng)基中甘露醇濃度，否則將會(huì)影響細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)。胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成濃度，否則將會(huì)影響細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)。胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)。然后經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體，最后發(fā)育成植株。發(fā)細(xì)胞團(tuán)。然后經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體，最后發(fā)育成植株。發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是細(xì)胞分裂素，而生長(zhǎng)素含量較芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是細(xì)胞分裂素，而生長(zhǎng)素含量較低。胚性細(xì)胞的主要特

20、點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大。低。胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大。(3)分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后，可以通過(guò)原生質(zhì)體融合的方法分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后，可以通過(guò)原生質(zhì)體融合的方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。在體外擴(kuò)增相關(guān)基因的方法是采用株。在體外擴(kuò)增相關(guān)基因的方法是采用PCR技術(shù)。技術(shù)。答案答案(1)纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶(2)降低心形胚細(xì)胞分裂素降低心形胚細(xì)胞分裂素D(3)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合PCR本題組對(duì)應(yīng)選修三本題組對(duì)應(yīng)選修三P21P37，克隆技術(shù)，克隆技術(shù)1.愈

21、傷組織是由相對(duì)愈傷組織是由相對(duì)的活的的活的細(xì)胞團(tuán)組成，其細(xì)胞團(tuán)組成，其細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)、液泡、液泡而細(xì)胞核而細(xì)胞核。2.由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間_差異，細(xì)胞全能性差異，細(xì)胞全能性大不相同。有的如擬南芥、煙大不相同。有的如擬南芥、煙草和番茄等的培養(yǎng)細(xì)胞很草和番茄等的培養(yǎng)細(xì)胞很再生出新植株，并能在多個(gè)世再生出新植株，并能在多個(gè)世代中代中細(xì)胞全能性表達(dá)；而有的如小麥、玉米和水細(xì)胞全能性表達(dá)；而有的如小麥、玉米和水稻等的一些品種或品系的培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出的再生植株，在多稻等的一些品種或品系的培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出的再生植株，在多次

22、繼代培養(yǎng)后，會(huì)次繼代培養(yǎng)后，會(huì)細(xì)胞全能性表達(dá)能力。細(xì)胞全能性表達(dá)能力。沒(méi)有分化沒(méi)有分化薄壁薄壁豐富豐富小小大大遺傳性遺傳性表達(dá)程度表達(dá)程度容易容易保持保持喪失喪失3.在長(zhǎng)期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可在長(zhǎng)期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體能原因有染色體、細(xì)胞核、細(xì)胞核或或產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是的；細(xì)胞或組織中的；細(xì)胞或組織中平衡被打破，或細(xì)胞對(duì)外源生長(zhǎng)物質(zhì)的平衡被打破，或細(xì)胞對(duì)外源生長(zhǎng)物質(zhì)的發(fā)生改發(fā)生改變；隨著時(shí)間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏變；隨著時(shí)間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏的細(xì)胞系。的細(xì)胞系。4.通過(guò)大量培養(yǎng)特定細(xì)

23、胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要通過(guò)大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過(guò)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過(guò)培養(yǎng)，培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體克?。辉谂囵B(yǎng)基中加入不同濃度的進(jìn)行單倍體克?。辉谂囵B(yǎng)基中加入不同濃度的或病原或病原體的體的，誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。，誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體?；兓冏儺愖儺惙钦扼w非整倍體不可逆不可逆激素激素敏感性敏感性成胚性成胚性次生代謝產(chǎn)物次生代謝產(chǎn)物花藥花藥NaCl毒蛋白毒蛋白5.動(dòng)物的組織經(jīng)過(guò)動(dòng)物的組織經(jīng)過(guò)或或消化，使其分消化，使其分散成散成細(xì)胞。然后，在人工控制的培養(yǎng)條件下，細(xì)胞。然后，在人工控制的培養(yǎng)條件下，使這些細(xì)胞得以

24、使這些細(xì)胞得以_，并保持生長(zhǎng)、分裂乃，并保持生長(zhǎng)、分裂乃和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象。和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象。6.理論上各種培養(yǎng)細(xì)胞都可被理論上各種培養(yǎng)細(xì)胞都可被，但原代培養(yǎng)細(xì)胞和，但原代培養(yǎng)細(xì)胞和有限細(xì)胞系克隆較有限細(xì)胞系克隆較；相反，無(wú)限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系；相反，無(wú)限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞系克隆較和腫瘤細(xì)胞系克隆較。這是因?yàn)橹挥袑?duì)培養(yǎng)環(huán)境。這是因?yàn)橹挥袑?duì)培養(yǎng)環(huán)境有有和具有較強(qiáng)和具有較強(qiáng)能力的能力的細(xì)胞，才容易做細(xì)胞克隆。在這方面，單細(xì)胞通常細(xì)胞，才容易做細(xì)胞克隆。在這方面，單細(xì)胞通常群體細(xì)胞；原代細(xì)胞、有限細(xì)胞通常群體細(xì)胞；原代細(xì)胞、有限細(xì)胞通常無(wú)限細(xì)胞、轉(zhuǎn)無(wú)限細(xì)胞

25、、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞?；蚰[瘤細(xì)胞。機(jī)械消化機(jī)械消化胰酶胰酶單個(gè)單個(gè)生存生存接觸抑制接觸抑制克隆克隆困難困難容易容易較大適應(yīng)范圍較大適應(yīng)范圍獨(dú)立生存獨(dú)立生存不如不如不如不如7.動(dòng)物的受精卵具有動(dòng)物的受精卵具有_,具有使后代細(xì)胞形成具有使后代細(xì)胞形成的潛能。隨胚胎發(fā)育，細(xì)胞的全能表達(dá)能力下降，成為的潛能。隨胚胎發(fā)育，細(xì)胞的全能表達(dá)能力下降，成為、直到體細(xì)胞，不再能分化為直到體細(xì)胞，不再能分化為其他細(xì)胞。低等動(dòng)物細(xì)胞的全能性一般比較容易其他細(xì)胞。低等動(dòng)物細(xì)胞的全能性一般比較容易。癌細(xì)胞癌細(xì)胞逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞。所以，無(wú)論分化還是癌逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞。所以，無(wú)論分化還是癌化，變化的都是化，變化的都是，基因組成的

26、完整性可以，基因組成的完整性可以。動(dòng)物體細(xì)胞中基因組成是完整的，但細(xì)胞分化使得基因的表動(dòng)物體細(xì)胞中基因組成是完整的，但細(xì)胞分化使得基因的表達(dá)發(fā)生了達(dá)發(fā)生了，細(xì)胞中合成了，細(xì)胞中合成了，細(xì)胞全能性難以發(fā)揮。細(xì)胞全能性難以發(fā)揮。8.體細(xì)胞羊的克隆成功證明了：體細(xì)胞羊的克隆成功證明了：(1)高度分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)一定技高度分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)一定技術(shù)處理，也可以回復(fù)到類似術(shù)處理，也可以回復(fù)到類似時(shí)期的功能；時(shí)期的功能；(2)在胚在胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有的作用。的作用。全能性全能性完整個(gè)體完整個(gè)體多能細(xì)胞多能細(xì)胞專能細(xì)胞專能細(xì)胞體現(xiàn)體現(xiàn)仍能仍能表現(xiàn)型表現(xiàn)型保留保留差異化差異化專一

27、的蛋白質(zhì)專一的蛋白質(zhì)受精卵受精卵調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育9.克隆羊獲得成功的部分原因：重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)雖然復(fù)克隆羊獲得成功的部分原因：重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)雖然復(fù)制了制了DNA，但，但并未開始；同時(shí)，供體核并未開始；同時(shí)，供體核DNA開始丟失來(lái)源于乳腺細(xì)胞的開始丟失來(lái)源于乳腺細(xì)胞的；在重組卵細(xì)；在重組卵細(xì)胞開始胞開始分裂時(shí)，原乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被分裂時(shí)，原乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被中的蛋白因子替換了，因此核中的蛋白因子替換了，因此核DNA被重新編排，胚細(xì)胞開始被重新編排，胚細(xì)胞開始基因，進(jìn)而調(diào)控胚在代孕母親子宮基因，進(jìn)而調(diào)控胚在代孕母親子宮中的進(jìn)一步發(fā)育。因此，采用中的進(jìn)一步發(fā)育。

28、因此，采用技術(shù)，選擇技術(shù)，選擇細(xì)胞進(jìn)行移植，并在核移植細(xì)胞進(jìn)行移植，并在核移植前對(duì)乳腺細(xì)胞進(jìn)行了前對(duì)乳腺細(xì)胞進(jìn)行了培養(yǎng)，有利于細(xì)胞核培養(yǎng)，有利于細(xì)胞核的一系列變化和細(xì)胞融合后基因表達(dá)的的一系列變化和細(xì)胞融合后基因表達(dá)的的啟動(dòng)。的啟動(dòng)。基因的轉(zhuǎn)錄基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)蛋白第三次第三次卵細(xì)胞質(zhì)卵細(xì)胞質(zhì)表達(dá)自己的表達(dá)自己的電脈沖細(xì)胞融合電脈沖細(xì)胞融合分裂分裂3次時(shí)的次時(shí)的營(yíng)養(yǎng)限制性營(yíng)養(yǎng)限制性分子開關(guān)分子開關(guān)角度角度1植物的克隆植物的克隆1.下圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程，下圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()A.過(guò)程需在適

29、宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理過(guò)程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.過(guò)程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變過(guò)程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C.過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D.過(guò)程需用適宜配比的植物激素處理過(guò)程需用適宜配比的植物激素處理解析解析植物細(xì)胞壁主要是由纖維素和果膠組成的，常選用纖維植物細(xì)胞壁主要是由纖維素和果膠組成的，常選用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，A正確；正確；紫外線照射誘變育種所依據(jù)的原理是基因突變或染色體畸變，紫外線照射誘變育種

30、所依據(jù)的原理是基因突變或染色體畸變，這種變異是不定向的，這種變異是不定向的，B錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；過(guò)程是脫分化，指已經(jīng)分化過(guò)程是脫分化，指已經(jīng)分化的植物器官、組織或細(xì)胞，當(dāng)受到創(chuàng)傷或進(jìn)行離體的植物器官、組織或細(xì)胞，當(dāng)受到創(chuàng)傷或進(jìn)行離體(也受到創(chuàng)也受到創(chuàng)傷傷)培養(yǎng)時(shí)，已停止分裂的細(xì)胞，又重新恢復(fù)分裂，細(xì)胞改變培養(yǎng)時(shí)，已停止分裂的細(xì)胞，又重新恢復(fù)分裂，細(xì)胞改變?cè)械姆只癄顟B(tài)，失去原有結(jié)構(gòu)和功能，成為具有未分化特性原有的分化狀態(tài)，失去原有結(jié)構(gòu)和功能，成為具有未分化特性的細(xì)胞。的細(xì)胞。C正確；正確；是再分化，需用適宜配比的植物激素誘導(dǎo)，是再分化，需用適宜配比的植物激素誘導(dǎo)，D正確。正確。答案答案B2.甲、乙是

31、染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分分A，乙含有效成分，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和和B的新的新型藥用植物。型藥用植物。回答下列問(wèn)題：回答下列問(wèn)題：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和酶和_酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的_，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成一步培養(yǎng)形成_組織，然后經(jīng)過(guò)組織，然后經(jīng)過(guò)_形成完整的雜形成完整的雜種植

32、株。這種培育技術(shù)稱為種植株。這種培育技術(shù)稱為_。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的物組織培養(yǎng)得到的_，用人工薄膜包裝后可得到人工種，用人工薄膜包裝后可得到人工種子。子。解析解析(1)該新型藥用植物是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的。該新型藥用植物是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得

33、的。要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交，因此首先用纖要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交，因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細(xì)胞壁，然后用維素酶和果膠酶去掉植物的細(xì)胞壁，然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑化學(xué)誘導(dǎo)劑(物理方法：離心、振動(dòng)等物理方法：離心、振動(dòng)等)誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了植物細(xì)胞的全能性。植物細(xì)胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是兩個(gè)

34、物種，二者不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生可如果植物甲、乙是兩個(gè)物種，二者不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過(guò)程育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的，因?yàn)樵跍p乙通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的，因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常的配子。數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體，因此，植物體細(xì)胞雜交得到的后代是由于甲、乙都是二倍體，因此

35、，植物體細(xì)胞雜交得到的后代是異源多倍體異源多倍體(四倍體四倍體)。(3)人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等因素限制，而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，因此，等因素限制，而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，因此，植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子，用到的核心技植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子，用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案答案(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷

36、再分化纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(分化分化)植植物體細(xì)胞雜交技術(shù)物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染的個(gè)體在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常色體聯(lián)會(huì)正常(3)胚狀體胚狀體1.植物組織培養(yǎng)的操作流程植物組織培養(yǎng)的操作流程2.脫分化和再分化的比較脫分化和再分化的比較比較內(nèi)容比較內(nèi)容脫分化脫分化再分化再分化過(guò)程過(guò)程外植體外植體愈傷組織愈傷組織愈傷組織愈傷組織幼苗幼苗形成形成體體特點(diǎn)特點(diǎn)排列疏松、高度液泡化排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞的薄壁細(xì)胞有根、芽有根、芽需要條件需

37、要條件a.離體離體b.適宜的營(yíng)養(yǎng)適宜的營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的細(xì)胞分裂素的比例適中比例適中d.一般不需光一般不需光a.離體離體b.適宜的營(yíng)養(yǎng)適宜的營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比細(xì)胞分裂素的比例高或低誘導(dǎo)生根或生芽例高或低誘導(dǎo)生根或生芽d.光照光照角度角度2動(dòng)物的克隆動(dòng)物的克隆1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆由多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆

38、D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀解析解析連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞一般都培養(yǎng)了多代，具有了連續(xù)增殖連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞一般都培養(yǎng)了多代，具有了連續(xù)增殖能力，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細(xì)胞具有異倍體核型，能力，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細(xì)胞具有異倍體核型，A錯(cuò)誤；細(xì)胞癌變是由相關(guān)基因突變引起的，如果癌細(xì)胞在一錯(cuò)誤；細(xì)胞癌變是由相關(guān)基因突變引起的，如果癌細(xì)胞在一定條件下發(fā)生回復(fù)性的基因突變，則有可能恢復(fù)成正常細(xì)胞，定條件下發(fā)生回復(fù)性的基因突變，則有可能恢復(fù)成正常細(xì)胞，B正確；細(xì)胞克隆的最基本的要求是，必須確定所建立的克隆正確；細(xì)胞克隆的最基本的要求是，必須

39、確定所建立的克隆來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞，來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)錯(cuò)誤；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性，而克隆化培養(yǎng)成的細(xì)胞株則具有相同的性狀，性，而克隆化培養(yǎng)成的細(xì)胞株則具有相同的性狀，D錯(cuò)誤。錯(cuò)誤。答案答案B2.某研究者用抗原某研究者用抗原(A)分別免疫分別免疫3只同種小鼠只同種小鼠(X、Y和和Z)，每只小，每只小鼠免疫鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。，結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的若要制備

40、雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)染色體數(shù)目目40條條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)染色體數(shù)目目60條條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤抗體的雜交瘤細(xì)胞。細(xì)胞。回答下列問(wèn)題。回答下列問(wèn)題。(1)制備融合所需的制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)以上，則小鼠最少

41、需要經(jīng)過(guò)_次免疫后次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這這3只免疫小鼠中，只免疫小鼠中，最適合用于制備最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是淋巴細(xì)胞的是_小鼠，理由是小鼠，理由是_。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目是個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目是_條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是淋巴細(xì)胞經(jīng)

42、多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。解析解析(1)據(jù)圖分析，第據(jù)圖分析，第4次免疫后次免疫后X、Y、Z小鼠的血清抗體效小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到價(jià)均達(dá)到16 000以上，小鼠以上，小鼠Y的的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故

43、體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后，小鼠的雜交瘤細(xì)胞形成后，小鼠的B淋巴細(xì)胞核與骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)淋巴細(xì)胞核與骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠的融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠的B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目染色體數(shù)目40條條)和和骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目染色體數(shù)目60條條)融合后，染色體可達(dá)融合后，染色體可達(dá)100條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能無(wú)增殖淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能無(wú)增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的。的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的。答案答案(1)4YY小鼠的抗體效價(jià)最高小鼠的抗體效價(jià)最高(

44、2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無(wú)限增殖不能無(wú)限增殖1.植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的異同植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的異同項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型固體或半固體培養(yǎng)基固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂糖、氨基酸、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無(wú)

45、機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物維生素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等血清等取材取材植物幼嫩部位或花藥等植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織動(dòng)物的器官或組織過(guò)程過(guò)程結(jié)果結(jié)果新的組織或植株個(gè)體，新的組織或植株個(gè)體，可以體現(xiàn)全能性可以體現(xiàn)全能性新的細(xì)胞系或細(xì)胞株，不形新的細(xì)胞系或細(xì)胞株，不形成個(gè)體，不體現(xiàn)全能性成個(gè)體，不體現(xiàn)全能性目的目的植株快速繁殖植株快速繁殖脫毒植株的培育脫毒植株的培育人工種子人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育皮膚移植

46、材料的培育檢測(cè)有毒物質(zhì)檢測(cè)有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究生理、病理、藥理學(xué)研究相同點(diǎn)相同點(diǎn)兩技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂，都是兩技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂，都是無(wú)性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂無(wú)性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂均為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、均為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件等條件2.列表法比較細(xì)胞系和細(xì)胞株列表法比較細(xì)胞系和細(xì)胞株種類種類來(lái)源來(lái)源特點(diǎn)特點(diǎn)細(xì)胞系細(xì)胞系有限細(xì)胞系有限細(xì)胞系由二倍體細(xì)胞傳代由二倍體細(xì)胞傳代培養(yǎng)建成培養(yǎng)建成有接觸抑制；不能連續(xù)培養(yǎng)有接觸抑制；不能連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系由傳代細(xì)胞連續(xù)培由傳代細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)建成養(yǎng)建成發(fā)

47、生了轉(zhuǎn)化，多數(shù)具有異倍體發(fā)生了轉(zhuǎn)化，多數(shù)具有異倍體核型；有些具有異體致瘤性；核型；有些具有異體致瘤性；有些具有不死性，但不致癌有些具有不死性，但不致癌細(xì)胞株細(xì)胞株有限細(xì)胞株有限細(xì)胞株通過(guò)一定的選擇或通過(guò)一定的選擇或純化方法，從原代純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞質(zhì)的細(xì)胞傳代次數(shù)有限傳代次數(shù)有限一般具有恒定一般具有恒定染色體組型、染色體組型、同功酶類型、同功酶類型、病毒敏感和生病毒敏感和生化特性等化特性等連續(xù)細(xì)胞株連續(xù)細(xì)胞株可可連續(xù)連續(xù)多次多次傳代傳代3.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 植物體細(xì)胞雜交植

48、物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原理原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性過(guò)程過(guò)程相關(guān)酶相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法融合方法物理法：離心、電激、振物理法：離心、電激、振動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外還除物理法和化學(xué)法外還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞意義意義克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株性，獲得雜種植株生產(chǎn)單克隆抗體；實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)單克隆抗體；實(shí)現(xiàn)基因定位基因定位