2020版高考生物一輪復習 生物技術與工程 第2講 微生物的培養(yǎng)和應用教學案 新人教版

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1、 第2講　微生物的培養(yǎng)和應用 [考綱展示]　1.微生物的分離和培養(yǎng)　2.某種微生物數(shù)量的測定　3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 考點一| 微生物的實驗室培養(yǎng) 1．培養(yǎng)基 (1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。 (2)種類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是是否添加凝固劑。 (3)營養(yǎng)成分： ①主要營養(yǎng)物質：碳源、氮源、水和無機鹽。 ②其他條件：pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣。 2．無菌技術 (1)關鍵：防止外來雜菌的入侵。 (2)不同對象的無菌操作方法(連線)： 答案：①—b—Ⅰ?、凇猙—Ⅱ　③、④—a?、荨猘—Ⅲ、Ⅳ?、蕖?/p>

2、b 3．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 (1)計算：依據(jù)配方比例，計算配制100 mL的培養(yǎng)基時，各種成分的用量。 (2)稱量：準確地稱取各種成分。 (3)溶化 (4)滅菌 (5)倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時，在酒精燈火焰旁倒平板。 4．純化大腸桿菌 (1)菌落：由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。 (2)純化大腸桿菌的方法 ①純化培養(yǎng)原理：在培養(yǎng)基上得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的菌落，即可獲得較純的菌種。 ②純化大腸桿菌的關鍵步驟：接種。 ③常用的微生物接種方法有兩種。 a．平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋

3、分散到培養(yǎng)基的表面。 b．稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。 5．菌種的保存方法 (1)對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。 (2)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。 1．選修1P18“旁欄小資料”，微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？ 提示：不是，微生物的接種技術還包括斜面接種、穿刺接種等方法，其核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。 2．如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。 (1)獲得圖A

4、、圖B效果的接種方法分別是什么？ 提示：稀釋涂布平板法；平板劃線法。 (2)某同學在用A方法純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是什么？為了防止雜菌污染，有同學建議加入抗生素，你覺得可以嗎？并說明理由。 提示：菌液濃度過高(土壤溶液稀釋不夠)。不可以，因為抗生素不但殺滅雜菌，而且也可以殺滅大腸桿菌，因此在培養(yǎng)基上不可以加入抗生素。 1．選擇無菌技術的原則 (1)考慮無菌技術的效果：滅菌的效果比消毒要好。 (2)考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。 2．純化大腸桿菌的兩種方法的異同 (1)相同點：平板劃線法和稀釋

5、涂布平板法都能獲得單細胞菌落。 (2)不同點：平板劃線法不能對微生物計數(shù)，而稀釋涂布平板法能對微生物計數(shù)。 考法1　考查無菌技術 1．(2018·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}： (1)在實驗室中，玻璃和金屬材質的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_____________________________________ ___________________________________

6、__________________________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________________。在照射前，適量噴灑________，可強化消毒效果。 (4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度，最可能的原因是___________________________ ____________________________________________________________。 解析：(1)在實

7、驗室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質的實驗器具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點表現(xiàn)為在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少。(3)紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細胞中的DNA分子。在利用紫外線照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強化消毒效果。(4)自來水通常采用氯氣消毒。(5)采用高壓蒸汽滅菌時，若壓力達到設定要求，而溫度未達到相應要求，最可能的原因是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。 答案：(1)可以　(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少　(3)破壞DNA結構　消毒液　(4)氯氣

8、　(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 考法2　考查微生物的純化技術 2．(2014·全國卷Ⅱ)為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_______________________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的

9、細菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_______________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。 解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合

10、格，可在涂布接種前，隨機取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 000＝3.8×107。 (2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。 (3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結果；B

11、培養(yǎng)基中細菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。 (4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營養(yǎng)物質的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質 3．某研究小組研究了不同濃度的抗生素A對大腸桿菌生長的影響，實驗結果見如圖1?；卮鹣铝邢嚓P問題： (1)該培養(yǎng)基為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)物質有碳源、水、無機鹽、________四類，而配置該培養(yǎng)基時，通常加入________作為凝固劑。

12、 (2)為了確保利用________________法接種大腸桿菌時，形成一層菌膜，則對菌種的稀釋倍數(shù)________。另外，在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時要特別注意進行__________操作。根據(jù)實驗結果，選出對大腸桿菌抑制作用最明顯的抗生素A濃度的依據(jù)是_______________________________ ____________________________________________________________。 (3)為減少實驗誤差，每一濃度的抗生素A還要制備________。 (4)該研究小組運用上述實驗方法還研究了相同濃度的a、b、c三種不同抗生素對大腸桿菌生

13、長的影響。請在圖2中圖示這一處理方案(可模仿圖1加以必要的注解)。 解析：(1)微生物生長繁殖所需要的四類主要營養(yǎng)物質是水、無機鹽、碳源和氮源。該實驗所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，常用的凝固劑是瓊脂。 (2)圖中接種大腸桿菌時所使用的接種方法是稀釋涂布平板法，為了得到菌膜，稀釋倍數(shù)不能太大。接種和培養(yǎng)大腸桿菌的關鍵是無菌操作。據(jù)圖1分析，⑤號圓紙片的抑菌圈最大，說明該濃度的抗生素A對大腸桿菌抑制作用最明顯。 (3)為減少實驗誤差，每一濃度的抗生素A還要制備多個圓紙片進行重復實驗。 (4)該方案的自變量為相同濃度的a、b、c三種不同抗生素，還應有空白對照，注意在圖中要標記清楚，具體圖解見答案

14、。 答案：(1)氮源　瓊脂　(2)稀釋涂布平板　不能太大　無菌　透明圈越大，抑制效果越明顯　(3)多個圓紙片　(4)圖示見如圖所示 考點二| 微生物的分離與計數(shù) 1．篩選菌株 (1)尋找目的菌株的方法：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。 (2)實驗室中微生物的篩選： ①方法：人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長。 ②實例：篩選尿素分解菌時使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 (3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。 2．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法 (1)顯微鏡直接計

15、數(shù)法 ①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。 ②方法：用計數(shù)板計數(shù)。 ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。 (2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法) ①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。 ②計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。 ③操作：設置重復組和對照組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～3

16、00的平板進行計數(shù)。 3．土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) (1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)分解尿素的細菌。 (2)原理 　　　　 　分解尿素的細菌 　　　　　　 　↓ CO(NH2)2＋H2O　CO2＋2NH3 　　　　　　　　　　　　　 ↓ 　　　　　　　　 酚紅指示劑―→變紅色 (3)實驗現(xiàn)象及結論 ①培養(yǎng)基變紅：該種細菌能分解尿素。 ②培養(yǎng)基不變紅：該種細菌不能分解尿素。 (4)統(tǒng)計菌落數(shù)目 統(tǒng)計樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。 (5)實驗流程 土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察→細菌的計數(shù)。 4

17、．分解纖維素的微生物的分離 (1)纖維素酶 ①組成：纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 ②作用： 纖維素纖維二糖葡萄糖 (2)纖維素分解菌的篩選 ①原理 　　　　　　　　　　 纖維素分解菌 　　　　　　　　　　　　 ↓ ―→紅色復合物紅色消失，出現(xiàn)透明圈。 ②篩選方法：剛果紅染色法，即通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 ③培養(yǎng)基：以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 ④實驗流程 ：富含纖維素的環(huán)境 　 ↓ ：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 　 ↓ ：制備系列稀釋液 　 ↓ ：將樣品涂布到鑒別纖

18、維素分解菌的培養(yǎng)基上 　 ↓ ：產(chǎn)生透明圈的菌落 1．選擇菌落數(shù)時，若得到3個或3個以上菌落數(shù)在30～300的平板是否一定正確？并說明理由。 提示：不一定。如得到3個平板，菌落數(shù)分別為200、34、240，雖然菌落數(shù)均在“30～300”，但由于34與另外兩個平板上的菌落數(shù)差異較大，應找出原因并重新實驗。 2．研究人員用含有剛果紅的培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落如圖所示。據(jù)圖回答以下問題： (1)簡述透明圈的形成過程。 提示：剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。細菌分泌的纖維素酶能將培養(yǎng)基中的纖維素

19、降解成纖維二糖和葡萄糖，形成透明圈。 (2)推測與圖中透明圈大小有關因素主要是什么？降解纖維素能力最強的菌種是哪種？ 提示：纖維素酶的產(chǎn)量和活性。 菌落①。 1．選擇培養(yǎng)基的作用原理 (1)在培養(yǎng)基中加入某種化學物質，如加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在滿足基本所需培養(yǎng)成分的基礎上加入。 (2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，如缺乏氮源時可以分離出固氮微生物；以石油作為唯一碳源時，可以分離出能消除石油污染的微生物。 (3)改變微生物的培養(yǎng)條件，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物，在高鹽環(huán)境中培養(yǎng)可分離得到耐鹽菌。

20、 2．目的微生物選擇的三種方法 (1)利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種在固體平板培養(yǎng)基上，根據(jù)目的微生物特定的菌落特征挑選目的微生物。 (2)利用選擇培養(yǎng)基直接篩選目的微生物。 (3)利用鑒別培養(yǎng)基鑒別篩選目的微生物。 考法1　考查微生物的選擇培養(yǎng) 1．(2017·全國卷Ⅰ)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題： (1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是_______________________________________________

21、_________ ____________________________________________________________。但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________ _____________________________________________(答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是___________________________________________ ____________

22、________________________________________________。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_________________________________________________________ ______________________________________________(答出兩點即可)。 解析：(1)有些細菌能分解尿素是因為這些細菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解成CO2和NH3。能分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機物，但這些細菌可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的

23、葡萄糖的主要作用是：作為能源物質氧化分解為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料。 (2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇尿素作為唯一氮源，這樣只有能分解尿素的細菌才能在培養(yǎng)基上生存。若選擇“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”作為氮源，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，它們可以為細菌生長提供無機營養(yǎng)；同時，KH2PO4和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。 答案：(1)脲酶　分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物

24、　為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料　(2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用　(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 考法2　微生物的分離與計數(shù) 2．(2018·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題： (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的

25、馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質，營養(yǎng)物質類型除氮源外還有____________(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有____________(答出兩點即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是___________ ____________________________________________________________。 (4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在

26、同一稀釋倍數(shù)下得到以下結果： 甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認為這兩位同學的結果中，乙同學的結果可信度低，其原因是________________________________________________ ____________________________________________________________。 解析：(1)在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用

27、于真菌的篩選，則應加入鏈霉素以抑制細菌的生長，其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質、脂質、無機鹽、水等多種物質，因此，除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機鹽等營養(yǎng)要素。進入細胞的氮源可參與合成蛋白質、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入顯色劑碘液后，淀粉遇碘變藍，而淀粉的水解產(chǎn)物 則不發(fā)生這種反應。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，土壤中能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉分解，菌落周圍就會出現(xiàn)透明圈，這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選能產(chǎn)淀粉酶的微生物了。(4)乙同學的結果中，1個平板的計數(shù)結果與另2個相差太遠，說明在操作過程中可能出

28、現(xiàn)了錯誤，結果的重復性太差，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。 答案：(1)細菌　選擇 (2)碳源、無機鹽　蛋白質、核酸 (3)碘液　淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈 (4)乙同學的結果中，1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差 3．為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對抗生素耐藥性情況”，某同學進行了如下實驗。請分析回答下列問題： (1)配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應加入適量的________和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進行的是________。 (2)接種微生物的方法有很多，圖中

29、過程①②③所示的方法為______________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位：個/mL)，這里的n＝________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，原因是_______ ____________________________________________________________。 (3)為了檢測乳酸菌對抗生素的敏感性，取該單菌落適當稀釋，接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含

30、A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A________(填“敏感”或“不敏感”)；含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是__________________。 解析：(1)配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外，還需要特殊的物質維生素，由于該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此還應加入適量的瓊脂作為凝固劑。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調pH。(2)接種微生物的方法有很多，圖中過程③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計樣本菌數(shù)落時，同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿，分別計數(shù)3次，取平均值，使實驗結果更加準

31、確可靠。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位：個/mL)，這里的n＝6。(3)在抗藥性檢驗過程中，如果在含某種抗生 素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌，因此該致病菌對抗生素A敏感；含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素C的耐藥菌。 答案：(1)維生素　調pH　(2)稀釋涂布平板法　6　分別計數(shù)3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠　(3)敏感　抗生素C的耐藥菌 真題體驗| 感悟高考　淬煉考能 1．(多選)(2016·江蘇高考)漆酶屬于木質素降解酶類，在環(huán)境修復

32、、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關敘述正確的是(　　) A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C．在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化 D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫下長期保存菌株 答案：BC 2．(2016·全國卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；

33、 ②制作無菌平板； ③設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作； ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于____________________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實驗組的操作是_______________________________ _____________________________________________________________。 (3)若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白

34、對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。 解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟②，需要進行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。(2)該實驗的空白對照組為不進行處理的無菌平板，實驗組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時間。(3)若空白對照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明實驗過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻讓φ战M的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，導致實驗變量不唯

35、一，不能確定實驗組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實驗組的菌落平均數(shù)。 答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂　(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時間 (3)污染　不正確 3．(2014·全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基

36、上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng) 基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_________________________________________； 培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”

37、)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________________________________________ ____________________________________________________________。 解析：(1)纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅是一種染料，可以與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物就無法形成，培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)

38、生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用于分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，并且培養(yǎng)基中需含有纖維素，才能與CR形成紅色復合物，有纖維素分解菌時才能形成以纖維素分解菌為中心的透明圈。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈 (3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR—纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 4．(2018·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關的問題： (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應

39、采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落，菌落的含義是_________________________________________________ ___________________________________________________________。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵

40、母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是___________________________________ ____________________________________________________________。 解析：(1)酵母菌為異養(yǎng)型生物，通常使用麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱為菌落。(2)酵母菌為兼性厭氧型生物，有氧條件利于其繁殖，無氧條件下其進行酒精發(fā)酵。(3)酵母菌分解葡萄糖可產(chǎn)生二氧化碳，使面包松軟多孔。 答案：(1)麥芽汁瓊脂　高壓蒸汽　由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體　(2)菌體快速增殖　乙醇產(chǎn)生　(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟 - 14 -