2019-2020年高中生物 第30課 動物細(xì)胞工程教案 新人教版必修3.doc

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2019-2020年高中生物 第30課 動物細(xì)胞工程教案 新人教版必修3 考試說明具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn) 等級 生物課程標(biāo)準(zhǔn)學(xué)習(xí)要求 動物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆 A 簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及其應(yīng)用 簡述克隆動物的概念和原理 簡述體細(xì)胞核移植技術(shù)和體細(xì)胞克隆及其應(yīng)用前景 關(guān)注體細(xì)胞克隆技術(shù)的安全性和倫理性問題 細(xì)胞融合與單克隆抗體 A 簡說出述動物細(xì)胞融合的方法和過程 說出 單克隆抗體的制備過程及其應(yīng)用 認(rèn)同細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系 關(guān)注細(xì)胞工程研究的發(fā)展和應(yīng)用前景 一、教學(xué)內(nèi)容及考綱要求 二、重要的結(jié)論性語句： 1、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。 2、原代培養(yǎng)階段，培養(yǎng)的細(xì)胞最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長特性，很適合用于藥物測試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。 3、一般情況下，傳代培養(yǎng)10－50次后，細(xì)胞增殖會明顯減緩，甚至完全停止。少部分細(xì)胞的細(xì)胞核型發(fā)生變化，獲得不死性。 4、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要嚴(yán)格的環(huán)境條件，包括無菌無毒、溫度、pH、氣體和營養(yǎng)物質(zhì)（如葡萄糖、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生長因子等。在使用合成培養(yǎng)基時(shí)還需加入動物血清等天然成分）。 5、動物細(xì)胞核移植是將動物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新胚胎，并最終發(fā)育為動物個(gè)體。 6、細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 7、動物細(xì)胞融合技術(shù)的最重要的用途之一是制備單克隆抗體。 8、單克隆抗體制備中，第一次篩選：用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次篩選：通過抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 9、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體。 10、單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備。 三、重、難點(diǎn)知識歸類、整理 1、植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 比較項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動物細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)原理 細(xì)胞全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng) 基 物理性質(zhì) 固體 液體 化學(xué)成分 營養(yǎng)物質(zhì)、激素 營養(yǎng)物質(zhì)、動物血清 培養(yǎng)材料 常用植物幼嫩部位或花藥 常用動物胚胎或出生不久的幼齡 動物的器官或組織 培養(yǎng)結(jié)果 培育成植株 培育成細(xì)胞株或細(xì)胞系 培養(yǎng)目的 快速繁殖、培育無病毒植株 獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品等 聯(lián)系 均為無菌操作,需要適宜的溫度,pH值,O2等條件 2、植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 細(xì)胞融 合原理 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞融 合方法 酶解法去細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體 融合 胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散后誘導(dǎo) 細(xì)胞融合 誘導(dǎo) 手段 離心、振動、電刺激、 聚乙二醇誘導(dǎo) （同上） 再加上滅活的病毒誘導(dǎo) 用途 獲得雜種植株 主要：制備單克隆抗體 3、受精作用、原生質(zhì)體融合、動物細(xì)胞融合 受精作用 原生質(zhì)體融合 動物細(xì)跑融合 不 同 細(xì)胞類型 精子與卵細(xì)胞 體細(xì)胞 體細(xì)胞 細(xì)胞來源 來自同一生物個(gè)體 一般來自不同種的生物個(gè)體 一般來自不同種的生物個(gè)體 染色體數(shù)目變化 2N 2N1+2N2 2N1+2N2 融合條件 不需人工誘導(dǎo) 需人工誘導(dǎo) 需人工誘導(dǎo) 同 都有兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，并且融合成這個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)都是由原來的兩個(gè)細(xì)胞決定的 4、試管動物與克隆動物 試管動物（嬰兒）:。通過體外受精和胚胎移植技術(shù)而產(chǎn)生的動物或嬰兒，其實(shí)質(zhì)是通過有性生殖而形成的后代。在這一技術(shù)過程中，精子和卵子從動物（人）體內(nèi)取出來，在人工提供的生活條件下（通常是在試管中）進(jìn)行受精，并讓體外受精的受精卵在試管中發(fā)育，再把發(fā)育到一定階段的胚胎移植到“代理母親”動物（人）的子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育直到誕生。 克隆動物：一般是指通過無性繁殖形成動物后代。將供體體細(xì)胞的細(xì)胞核與受體去核卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行人工組合，借助卵細(xì)胞的發(fā)育能力，經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進(jìn)而形成個(gè)體?？寺∈侵笩o性繁殖系，具體地說，是指從一個(gè)共同的祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體?？寺∫部芍笩o性繁殖的過程。 5、動物細(xì)胞工程與基因工程、胚胎工程的聯(lián)系 動物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞，因此基因工程離不開動物細(xì)胞的培養(yǎng)?？寺游飫t是通過體細(xì)胞核移植形成的重組細(xì)胞發(fā)育成的胚胎也要經(jīng)過胚胎移植等胚胎工程技術(shù)完成。 四、例題解析： 例1：下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是 A． 電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動物細(xì)胞融合 B． 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理 C． 小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體 D． 某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同 例2：下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請根據(jù)圖回答下列問題： ①請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆制備過程的順序連接起來。 ②在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有 、 的特性。 ③由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了 和 的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段。 課堂練習(xí) 一 、單選題： 1．為了使用于培養(yǎng)的動物組織細(xì)胞分散開以便配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取來的動物組織應(yīng)選用下列哪種物質(zhì)處理 A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.鹽酸 D.胰脂肪酶 2．在克隆多利羊的過程中，下列哪項(xiàng)技術(shù)沒有運(yùn)用到 A.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B.細(xì)胞核移植 C.胚胎移植技術(shù) D.基因工程技術(shù) 3．科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 4．動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是 A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞 5．能使動物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動 6．一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能 （ ） A．有選擇地繁殖某一性別的家畜 B．繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C．用于保存物種 D．改變動物的基因型 7．單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是 （ ） ①B淋巴細(xì)胞 ②小鼠骨髓瘤細(xì)胞 ③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 ④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 ⑤雜交瘤細(xì)胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ 8．植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是 A．纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性 B．植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞的全能性 C．原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合——生物膜的流動性 D．紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)——細(xì)胞分裂 9．在下列自然現(xiàn)象或科學(xué)研究成果中，能為“動物細(xì)胞具有全能性”觀點(diǎn)提供直接證據(jù)的是 A．壁虎斷尾后重新長出尾部 B．蜜蜂的未受精卵細(xì)胞發(fā)育成雄蜂 C．用體外培養(yǎng)的皮膚治療燒傷病人 D．小鼠腺細(xì)胞的自我復(fù)制 10．利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是 A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B．體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體 C．將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者 11．下列哪一項(xiàng)屬于克隆 A．將雞的某個(gè)DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上 B．將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi) C．將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 D．將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系 二、多選題： 12．下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是 （　 ） A．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導(dǎo) B．融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體 C．體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯 13．（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細(xì)胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)的是 （　 ） 　　A.效應(yīng)B細(xì)胞 B．T淋巴細(xì)胞 C.骨髓瘤細(xì)胞 D．雜交瘤細(xì)胞 三、非選題： 14．右圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答： （1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_____________ 處理，除去了　　　　　　；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是　　　　　　　　　　　　。融合完成的標(biāo)志是　　　　　　　　　　。 （2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用 　　　　　　 　　　　　技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。 （3）若A、B是動物細(xì)胞，一般取自　　　　　　　　　 ，然后用 使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是 　　 ，所形成的D稱為 　　　　　 ，A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有 。 （4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了________________________________________，圖中B為 　　　　　 。 （5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有 種（只考慮兩兩融合），用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是 　　　　　　 。從中選擇出它的方法是 　　 　　　 培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 　　　　 。 15.兩場籌備了10年的“太空結(jié)合”首次在神舟八號飛船上舉行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,新人在“產(chǎn)房”——電融合儀內(nèi)孕育新生命。160min后,中國首批“太空娃娃”終于順利誕生?！疤胀尥蕖闭Q生和地面實(shí)驗(yàn)如圖所示。請回答下列問題： (1)小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞能融合在一起,體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有__________的特點(diǎn)。 (2)若用于SARS的預(yù)防上,則宜采用_______細(xì)胞?？茖W(xué)工作者正在研究治療癌癥使用的生物導(dǎo)彈是____　　　__　　　　　　　　　　_。 (3)B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞都是由________________細(xì)胞形成的。這種相同細(xì)胞的后代,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上產(chǎn)生穩(wěn)定差異的過程,叫做 _____。 (4)鼠的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,在培養(yǎng)時(shí)通過_______________（有絲/減數(shù)）分裂方式大量繁殖。細(xì)胞中染色體數(shù)目與淋巴細(xì)胞相比有何特點(diǎn)？_____________；要觀察融合后的細(xì)胞中的染色體形態(tài)、數(shù)目,可用一定濃度的 處理。 (5)融合的細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的特性,即_______________和___________________。 課后練習(xí) 一、單選題： 1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是 A．培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體　B．培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無限地增殖 C．人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株　　D．用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞 2．單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是 A．特異性強(qiáng)、靈敏度高 　　　 B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D．由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌 3．關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 A．可以制成診斷盒．用于疾病的珍斷 B．可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療 C．可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D．可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn) 4．下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述中，錯(cuò)誤的是 A．植物細(xì)胞融合必須先制備原生質(zhì)體 B．試管嬰兒技術(shù)包括人工受精和胚胎移植兩方面 C．經(jīng)細(xì)胞核移植培育出新個(gè)體只具有一個(gè)親本的遺傳性狀 D．用于培養(yǎng)的植物器官或?qū)儆谕庵搀w 5．用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是 A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞 C．用聚乙二醇（PEG）作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 D．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 6．人類寄希望于利用干細(xì)胞（人體中具有分裂、分化能力的細(xì)胞）的分離和體外培養(yǎng)，在體外培育出組織器官，并最終通過組織或器官移植實(shí)現(xiàn)對臨床疾病的治療。能否用肌細(xì)胞代替干細(xì)胞 A．不能，因?yàn)榧〖?xì)胞與干細(xì)胞所含有的遺傳物質(zhì)不同 B．不能，因?yàn)榧〖?xì)胞是高度分化的細(xì)胞，沒有分裂能力 C．能，因?yàn)榧〖?xì)胞雖然是分化的細(xì)胞，但在一定條件下也可脫分化，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性 D．能，因?yàn)榧〖?xì)胞與干細(xì)胞具有完全相同的遺傳物質(zhì) 7．下列屬于組織培養(yǎng)但不是克隆的是 （ ） A．將花粉離體培養(yǎng)成單倍體植株 B．芽發(fā)育成枝條 C．根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D．上皮細(xì)胞無性繁殖產(chǎn)生的細(xì)胞群 8．動物細(xì)胞培養(yǎng)液和植物組織培養(yǎng)液的共有成分是 （ ） A．葡萄糖 B．蔗糖 C．動物血清 D．維生素 9．動物細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞來自于 （ ） A．任何個(gè)體的細(xì)胞 B．只能取自動物胚胎細(xì)胞 C．只能取自幼齡動物的組織細(xì)胞 D．胚胎或幼齡動物的器官和組織細(xì)胞 10．動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是 （　 ） 　A.動物細(xì)胞培養(yǎng)　 B．動物細(xì)胞融合 C．單克隆杭體 D．胚胎、核移植 11.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ） 　　A.單克隆抗體 　　　　　　　　 B.雜交瘤細(xì)胞 　　C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞　　D.在單抗上連接抗癌藥物 12．.如用動物的細(xì)胞進(jìn)行克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇的細(xì)胞核不能是　　　　　　?。? ） A、乳腺細(xì)胞的 B、卵細(xì)胞的 C、胃腺細(xì)胞的 D、囊胚時(shí)期的胚胎細(xì)胞的 13．單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中無法生長；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是 （ ） A．骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 B．脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 C．骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 D．脾細(xì)胞 14．研究單克隆抗體治療癌癥的思路是 （ ） A．利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞 C．抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成 D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合 15．用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞 （　 ） A.容易產(chǎn)生各種變異 B．具有更強(qiáng)的全能性 C.取材十分方便 　　 D．分裂增殖的能力強(qiáng) 16．動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 （　 ） ①誘導(dǎo)融合的方法完全相同 ②所用的技術(shù)手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成雜種細(xì)胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 17．有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是 A．動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散 B．動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白 C．細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中 D．培養(yǎng)至50代后能繼續(xù)傳代的傳代細(xì)胞叫細(xì)胞株 二.多選題 18．關(guān)于制備單克隆抗體的敘述不正確的是 A．單克隆抗體產(chǎn)自淋巴細(xì)胞 B．單克隆抗體的制備要經(jīng)過細(xì)胞融合 C．單克隆抗體的獲得不需要使細(xì)胞癌變 D．必須同時(shí)在體內(nèi)和體外培養(yǎng)挑選出所需抗體的細(xì)胞群 19．對細(xì)胞全能性的表述不正確的有 A．沒有離體植物細(xì)胞也能表現(xiàn)出全能性 B．動物細(xì)胞融合標(biāo)志著動物細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn) C．單克隆抗體的制備原理依據(jù)是細(xì)胞的全能性 D．花粉可培育成單倍體，是細(xì)胞全能性的體現(xiàn) 20．將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是 A．B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合后才能產(chǎn)生抗體 B．B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 C．骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 D．骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體 21．動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息可以獲得的正確結(jié)論有 : A．正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同 B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同 C．培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng) D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大 三、非選題： 22、下圖為細(xì)胞融合的簡略過程（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合），請據(jù)圖回答： I．若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個(gè)煙草品種細(xì)胞的花粉，且這兩對基因位于非同源染色體上，由于一對隱性純合基因(rr或hh) 的作用，在光照強(qiáng)度大于800勒克斯時(shí)，都不能生長。 （1）實(shí)驗(yàn)開始時(shí)必須用 除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。 （2）實(shí)驗(yàn)中除獲得雜種細(xì)胞外，還有基因型為 　　 的融合細(xì)胞。 （3）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，方法： （4）將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株依據(jù)的理論基礎(chǔ)是 　　 。 II．若該過程是制備治療“SARS”病毒的單克隆抗體，A為人B淋巴細(xì)胞（染色體組成為2A＋XX=46），B為鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體組成為2A＋XX=40） （5）用單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”主要利用了抗體的 特性。 （6）A細(xì)胞來自于 ，雜種細(xì)胞C共有 個(gè)染色體組。 （7）雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)與植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是培養(yǎng)基要用 培養(yǎng)基。（物理狀態(tài)），培養(yǎng)基中除了添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)為還需加入 。 23、肺癌在全國的發(fā)病率居腫瘤之首，小細(xì)胞肺癌是惡性程度最高的一種，上海肺癌研究所細(xì)胞與分子免疫研究室在國內(nèi)率先研制出一種名叫“2F7”的靶向生物導(dǎo)彈。這種生物導(dǎo)彈是一種專門對小細(xì)胞肺癌產(chǎn)生特定靶向性的特異性單克隆抗體。注入靜脈后，會“直撲”小細(xì)胞肺癌病灶，使其攜帶的腫瘤化療藥物能“集中火力”抑制、殺滅腫瘤細(xì)胞。這預(yù)示著化療藥物有望彌補(bǔ)“良莠不分”、損害全身免疫力的缺陷。 （1）制備單克隆抗體的原理是 。 （2）制備單克隆抗體用到的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段有 。 （3）單克隆抗體是由 細(xì)胞產(chǎn)生的。 （4）靜脈注入而不是口服單克隆抗體的原因是 。 （5）單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的過程屬于 免疫的 階段。 24．為某同學(xué)根據(jù)右圖雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案，據(jù)圖回答： 1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？_________原因是______________________________。 （2）圖中②為_________過程，常用_______________________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承了_________________，因此不僅能分泌_________，還有_________________本領(lǐng)。 （3）破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可以從_______和_______中提取。 （4）該方案的目的是_________________。 25、右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題： （1）給小鼠注射抗原的目的是__________________。 （2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_________________________的特性。 （3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了____ __和__________的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是可用________________。 （4）動物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有________________。 （5）在動物細(xì)胞融合過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開，以利于細(xì)胞融合，可用___________處理離體組織細(xì)胞使之分散開。 （6）圖中有兩次篩選過程，其中步驟④的目的是篩選出___________ _____，步驟⑤⑥的目的是篩選出________ _______。 （7）請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法：____________ ______________。原理：______________ ________ 26、(1)在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂長年到細(xì)胞表面 時(shí)，細(xì)胞會停止分裂增增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是 。 (2)隨首細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)面出現(xiàn) 的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變面變成 細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性 ，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 。 (3)現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被污色，而活細(xì)胞不染色，原因是 。 (4) 檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染一的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。 (5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在 條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中 的活性降低，細(xì)胞 的速率降低。 (6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作 進(jìn)行攻擊。 27、現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列有關(guān)問題。 Ⅰ．實(shí)驗(yàn)原理： 根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(以下稱Q值)，可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。 Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動物細(xì)胞培養(yǎng)液、動物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。 Ⅲ．實(shí)驗(yàn)步驟： (1)制備細(xì)胞懸浮液。 把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。 (2)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。 ①取A、B、C 3個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶， ； ②A、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻； ③ (3)制作臨時(shí)裝片。 ①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相； ②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央， ，3min~5min后，蓋上蓋玻片。 （4）鏡檢和統(tǒng)計(jì) 把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于 期的細(xì)胞，并與 進(jìn)行對比，統(tǒng)計(jì)并計(jì)算該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(Q值)。 Ⅵ.結(jié)果分析與結(jié)論： （1）經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是 。 （2）在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起 作用，C瓶的Q值說明 ?！　? 28、自然界中有一種含有葉綠體的原生動物—眼蟲，這說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動物細(xì)胞中存活。某同學(xué)提出問題“動物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎？”他嘗試設(shè)計(jì)出下列具體的實(shí)驗(yàn)方案。結(jié)合實(shí)驗(yàn)方案回答： 實(shí)驗(yàn)原理：根據(jù)眼蟲的特點(diǎn)，動物細(xì)胞和植物細(xì)胞之間在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。實(shí)驗(yàn)步驟如下： （1）①中選的植物材料細(xì)胞中，必須有的細(xì)胞器是 。 （2）③過程所用的酶是 和 （3）④過程除了用電激之外，還可以用 、 　　　 等做誘導(dǎo)因素。 （4）⑤過程動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是 、 、 、 。 （5）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，要強(qiáng)調(diào)所用的器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作，原因是 。 （6）在⑤⑥過程中，通常要添加血清，原因是 。 （7）如果讓動植物雜交種批量培養(yǎng)生產(chǎn)，可以用 技術(shù)。 （8）動植物雜交種細(xì)胞是否有細(xì)胞壁？ 。理由是 。 第30課 動物細(xì)胞工程答案 例1：解析：植物原生質(zhì)體融合或動物細(xì)胞融合均需誘導(dǎo)，誘導(dǎo)方法可以是電刺激等物理方法，聚乙二醇處理等化學(xué)方法，動物細(xì)胞還常用滅活的病毒誘導(dǎo)融合。去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁常用纖維素酶和果膠酶，將動物組織分散成單個(gè)細(xì)胞常用胰蛋白酶。小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞的主要用途是制備單克隆抗體。某種植物（如：染色體數(shù)目為2N），甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種的染色體數(shù)目是兩品種體細(xì)胞染色體數(shù)之和（4N），甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目不改變（2N）。 選D 例2：解析：單克隆抗體的制備是利用了雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)，單克隆抗體的制備包括誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞融合，經(jīng)過多次篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)體外或體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲得單克隆抗體，其中重要的技術(shù)手段包括動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)等。 ① ②在體外大量繁殖 產(chǎn)生特異性抗體 ③動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 課堂練習(xí) 1B　2D　3A　4B　5B　6D　7A　8B　9B　10D　11D　　12BCD　13ABCD 14．（1）纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁 　離心、振動、電激 產(chǎn)生新的細(xì)胞壁 （2）植物組織培養(yǎng) （3）幼齡動物的組織或器官或胚胎 胰蛋白酶 滅活的病毒誘導(dǎo) 雜種細(xì)胞 流動性 （4）抗原 效應(yīng)B細(xì)胞、記憶細(xì)胞、抗體 骨髓瘤細(xì)胞 （5）3 雜交瘤細(xì)胞 用特定選擇培養(yǎng)基 小鼠腹腔內(nèi)增殖 15．（1）一定的流動性 （2）SARS病毒感染后產(chǎn)生的效應(yīng)B細(xì)胞,單克隆抗體+抗癌藥物（3）造血干細(xì)胞 細(xì)胞分化（4）有絲　加倍　龍膽紫 （5）無限增值,產(chǎn)生單一抗體 課后練習(xí) 1D　2C　3D　4C　5B　6B　7A　8D　9D　10A　11D　12B　13C　14D　15D　16C　17A　18ACD　19ABC　20BD 21BCD 22（1）纖維素酶(或果膠酶)（2）rrHH、RRhh（3）置大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，收集分化的細(xì)胞團(tuán) （4）細(xì)胞的全能性 II （5）抗體與抗原結(jié)合，發(fā)揮特異性免疫效應(yīng) （6）非典患者　2；（7）液體　動物血清 23（1）每種效應(yīng)B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體 　瘤細(xì)胞能無限增殖 （2）動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)　?。?）雜交瘤 （4）抗體是蛋白質(zhì)，若口服則被消化，使抗體失去其功能　?。?）體液 效應(yīng) 24（1）不能 因?yàn)闆]有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生此種抗體的效應(yīng)B細(xì)胞 （2）細(xì)胞融合 滅活的病毒（或聚乙二醇） 雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì) 特異性抗體 在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖 （3）培養(yǎng)液 小鼠腹水 （4）制備單克隆抗體 25(1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 滅活病毒 (4)動物血清(5)胰蛋白酶 (6)雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(7)方法：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞　　原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖 26（1）相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 （2）衰老甚至死亡 不死性 降低減少 （3）由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色（或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色） （4）中 （5）冷凍（或超低溫、液氮） 酶 新陳代謝 （6）抗原 27 I．有毒物質(zhì)會使動物細(xì)胞發(fā)生染色體變異 Ⅲ．(2)①分別放人等量的細(xì)胞懸浮液 ③把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37℃(或適宜溫度)的恒溫箱中培養(yǎng) (3)②加1～2滴龍膽紫溶液染色 (4)有絲分裂中小白鼠正常細(xì)胞有絲分裂中期高倍顯微照片 Ⅳ．(1)甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性．且乙的毒性比甲的毒性大 (2)對照動物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體變異頻率非常低 28⑴葉綠體 ⑵纖維素酶和果膠酶 ⑶病毒 聚乙二醇（振蕩、離心、生物、化學(xué)因素等） ⑷無菌、無毒的環(huán)境 營養(yǎng) 溫度和pH 氣體環(huán)境 ⑸組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長，所以組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌不但會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)，而且這些雜菌生長的過程中會生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡（2分） ⑹由于人們對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，通常加入血清、血漿等一些天然成分 ⑺動物細(xì)胞培養(yǎng) ⑻無 因?yàn)榕咛ピ谀阁w子宮中完成胚胎發(fā)育