2019高考生物一輪總復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 第2講 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用課件 新人教版選修1 .ppt

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選修一生物技術(shù)實(shí)踐 選考內(nèi)容 第二講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用 1 培養(yǎng)基 1 概念 人們按照微生物對 的不同需求 配制出供其 的營養(yǎng)基質(zhì) 2 營養(yǎng)構(gòu)成 一般都含有 和無機(jī)鹽 此外還需要滿足微生物生長對 氧氣以及 的要求 3 種類 按照物理性質(zhì)可分為 培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 考點(diǎn)一微生物的分離與培養(yǎng) 營養(yǎng)物質(zhì) 生長繁殖 水 碳源 氮源 pH 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 液體 2 無菌技術(shù) 1 含義 指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止 的方法 2 關(guān)鍵 防止 的入侵 3 不同對象的無菌操作方法 連線 雜菌污染 外來雜菌 稱量 滅菌 倒平板 接種 常用的微生物接種方法有兩種a 平板劃線法 是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 b 稀釋涂布平板法 是將菌液進(jìn)行一系列的 然后將 的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進(jìn)行培養(yǎng) 3 菌種的保存方法 對于頻繁使用的菌種 可以采用 的方法 對于需要長期保存的菌種 可以采用 的方法 連續(xù)劃線的操作 梯度稀釋 不同稀釋度 臨時(shí)保藏 甘油管藏 判斷下列說法的正誤 1 倒平板時(shí) 應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊 以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 2 培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌 3 從有機(jī)廢水中分離分解有機(jī)物的微生物時(shí) 接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 4 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物 又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害 5 培養(yǎng)基一般都含有水 碳源 氮源和無機(jī)鹽 有時(shí)還需要加入一些特殊的物質(zhì) 6 下圖中甲為平板劃線中最重要的環(huán)節(jié) 乙為操作的結(jié)果 每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒 除第一次劃線外 每一次劃線的起點(diǎn)都是第一次劃線的末端 7 用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí) 只要稀釋度足夠高 就能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 8 為了防止污染 接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 提示 1 獲得效果A的接種方法為稀釋涂布平板法 獲得效果B的接種方法為平板劃線法 2 最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)滅菌 采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)滅菌 1 培養(yǎng)基配制 1 培養(yǎng)基的成分 2 培養(yǎng)基的分類 3 牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備 高考警示 1 培養(yǎng)基的配制原則 目的要明確 根據(jù)微生物的種類 培養(yǎng)目的等選擇原料配制培養(yǎng)基 如培養(yǎng)自養(yǎng)型的微生物就不用加入有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì) 營養(yǎng)要協(xié)調(diào) 注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例 pH要適宜 各種微生物適宜生長的pH范圍不同 2 微生物對主要營養(yǎng)物質(zhì)的需求特點(diǎn)不同種類的微生物代謝特點(diǎn)不同 因此對培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的需求也不同 自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機(jī)鹽 碳源可來自大氣中的CO2 氮源可由含氮無機(jī)鹽提供 異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物 即碳源必須由含碳有機(jī)物提供 氮源也主要是由有機(jī)物提供 部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機(jī)氮源 2 純化微生物的接種方法 1 兩種接種方法的比較 2 平板劃線操作的注意事項(xiàng) 操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌 劃線操作結(jié)束時(shí) 仍需灼燒接種環(huán) 每次灼燒目的如下表 灼燒接種環(huán) 待其冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始 能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少 最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落 劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連 劃線用力大小要適當(dāng) 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 3 消毒和滅菌的辨析 有些細(xì)菌可分解原油 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株 回答問題 1 在篩選過程中 應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 從功能上講 該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 純化菌種時(shí) 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即 和 原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 3 為了篩選出高效菌株 可比較單菌落周圍分解圈的大小 分解圈大說明該菌株的降解能力 4 通常情況下 在微生物培養(yǎng)過程中 實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 和 無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行 以避免周圍環(huán)境中微生物的污染 解析 1 選擇性培養(yǎng)基的特點(diǎn)是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 以促進(jìn)所需要的微生物的生長 而不需要的微生物無法生長 本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出可以分解原油的高效菌株 因此在篩選的時(shí)候選擇性培養(yǎng)基的碳源為原油 強(qiáng) 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰 2 純化微生物的方法有兩種 平板劃線法和稀釋涂布平板法 平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 在數(shù)次劃線后 可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體 這就是菌落 稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進(jìn)行培養(yǎng) 在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 3 分解圈是原油分解之后 菌株周圍形成的無原油的透明圈 菌株降解能力強(qiáng) 周圍原油被分解得多 分解圈大 4 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染 滅菌的方法有灼燒滅菌 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 酒精燈火焰附近溫度高 無菌 因此實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在其附近進(jìn)行 正確判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法 1 從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 2d后無菌落生長 說明培養(yǎng)基的制備是成功的 否則需要重新制備 2 從接種操作是否符合無菌要求上判斷 如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色 形狀 大小基本一致 并符合接種菌菌落的特點(diǎn) 說明接種操作是符合要求的 如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落 則說明接種過程中 無菌操作還未達(dá)到要求 需要分析原因 重新操作 技巧點(diǎn)撥 變式訓(xùn)練 A 解析 缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長 而固氮細(xì)菌能生長 在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌等原核生物細(xì)胞壁的合成 而霉菌屬于真核生物 能生長 在培養(yǎng)基中加入10 的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長 對放線菌的生長無影響 一 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1 分離原理土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素 是因?yàn)樗鼈兡芎铣?這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到 作用 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用 法 考點(diǎn)二微生物的篩選和計(jì)數(shù) 脲酶 催化 稀釋涂布平板 3 實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣 微生物的培養(yǎng)與觀察 細(xì)菌的 2 分解纖維素的微生物的分離 1 纖維素酶 組成 纖維素酶是一種 一般認(rèn)為它至少包括三種組分 即 作用 樣品的稀釋 計(jì)數(shù) 復(fù)合酶 C1酶 CX酶和葡萄糖苷酶 纖維二糖 葡萄糖 紅色復(fù)合物 透明圈 剛果紅 透明圈 纖維素 實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣 富含 的環(huán)境 選擇培養(yǎng) 用 培養(yǎng) 以增加纖維素分解菌的濃度 制備系列稀釋液 涂布平板 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生 的菌落 纖維素 選擇培養(yǎng)基 梯度稀釋 透明圈 判斷下列說法的正誤 1 篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中 尿素是唯一的氮源 2 分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí) 可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨 使得培養(yǎng)基的酸堿度降低 3 纖維素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要成分 在纖維素酶的作用下 纖維素可以水解成葡萄糖 4 剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物 所以可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌 5 在篩選能分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中 選擇培養(yǎng)的目的是增大樣品中目的菌株的濃度 6 剛果紅染色法只能在培養(yǎng)微生物的時(shí)候加入剛果紅 7 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上 篩到了幾株有透明降解圈的菌落如圖1所示 并用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4 在不同的溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵 測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖2 請分析 1 透明圈是如何形成的 2 圖中透明圈大小代表什么 降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是哪種 3 結(jié)合圖2推測哪種菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵 提示 1 剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物 但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng) 細(xì)菌分泌的纖維素酶能將培養(yǎng)基中的纖維素降解成纖維二糖和葡萄糖 形成透明圈 2 透明圈大小與纖維素酶的量和活性有關(guān) 降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌株 3 J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵 1 選擇培養(yǎng)基的選擇方法 1 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 例如 加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌 加入高濃度的食鹽可以分離出金黃色葡萄球菌 注意 這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入 2 改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分 例如 缺乏氮源時(shí)可分離出固氮微生物 石油作為唯一碳源時(shí)可分離出消除石油污染的微生物 3 改變微生物的培養(yǎng)條件 例如 將培養(yǎng)基置于高溫環(huán)境中培養(yǎng) 可得到耐高溫的微生物 2 篩選分解尿素的細(xì)菌與分解纖維素的微生物的比較 3 微生物的計(jì)數(shù) 1 兩種計(jì)數(shù)方法的比較 2 設(shè)置對照和重復(fù) 4 微生物的篩選與鑒別方法 1 微生物的篩選方法 單菌落挑取法 利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面 直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物 選擇培養(yǎng)法 利用選擇培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng) 直接獲得目的微生物 鑒定培養(yǎng)法 利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征 然后篩選目的微生物 2 微生物的鑒別方法 菌落特征鑒別法 根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀 大小 隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別 指示劑鑒別法 如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 培養(yǎng)某種微生物后 培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素 染色鑒別法 如利用剛果紅染色法 根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微生物 高考警示 選擇菌落數(shù)在30 300的平板 的兩個提醒用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物時(shí) 要求選擇菌落數(shù)在30 300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 解題時(shí)易出現(xiàn)以下誤解 1 只得到1個菌落數(shù)在30 300的平板是錯誤的 錯誤的原因是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則 易受到偶然因素的影響 2 得到3個或3個以上菌落數(shù)在30 300的平板 也不一定正確 這可能有兩種情況 不同平板間差異較大 如得到3個平板 菌落數(shù)分別為230 34 240 雖然菌落數(shù)均在 30 300 這也是不正確的 因?yàn)?34 與 230 240 差異太大 應(yīng)重新實(shí)驗(yàn)找出原因 不同平板之間差異不大 是符合要求的 用其平均值作為估算的最終結(jié)果 可見 并不是只要得到3個 菌落數(shù)在30 300的平板 即可 而應(yīng)該是涂布的同一稀釋度的平板均符合 菌落數(shù)在30 300的平板 且無較大差異 說明實(shí)驗(yàn)操作合格 才能按照計(jì)算公式進(jìn)行計(jì)算 D 解析 制備培養(yǎng)基時(shí) 需要將培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌 A正確 接種方法為稀釋涂布平板法 即需要制備不同的土壤稀釋液后才能倒平板 B正確 對照組和實(shí)驗(yàn)組需要放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) C正確 一般選擇菌落數(shù)在30 300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) D錯誤 2 2014 全國卷 39 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解 回答下列問題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶 其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時(shí) CR可與纖維素形成 色復(fù)合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí) 培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 變式訓(xùn)練 纖維二糖 葡萄糖 紅 透明圈 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲 乙兩種培養(yǎng)基 成分見下表 注 表示有 表示無 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 不能 液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落 不能 培養(yǎng)基中沒有纖維素 不會 形成CR 纖維素紅色復(fù)合物 即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 解析 1 纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物 是含量最豐富的多糖類物質(zhì) 能被土壤中某些微生物分解利用 分解纖維素的纖維素酶是一種復(fù)合酶 一般認(rèn)為它至少包括三種組分 即CX酶 C1酶和葡萄糖苷酶 前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖 第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖 2 剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物 當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后 紅色復(fù)合物無法形成 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌 3 根據(jù)有無瓊脂成分可推知 培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基乙為固體培養(yǎng)基 纖維素分解菌分離和鑒別要用固體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基甲不符合要求 培養(yǎng)基乙不含纖維素粉 不能形成特定的紅色復(fù)合物 乙培養(yǎng)基不符合要求 課末總結(jié) 思維導(dǎo)圖 1 有些細(xì)菌能分解尿素 有些細(xì)菌則不能 原因是前者能產(chǎn)生 能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源 原因是 但可用葡萄糖作為碳源 進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是 答出兩點(diǎn)即可 探究高考 明確考向 脲酶 分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物 不能利用CO2來合成有機(jī)物 為細(xì)胞生命活動提供能量 為 其他有機(jī)物的合成提供原料 2 為了篩選可分解尿素的細(xì)菌 在配制培養(yǎng)基時(shí) 應(yīng)選擇 填 尿素 NH4NO3 或 尿素 NH4NO3 作為氮源 不選擇其他兩組的原因是 3 用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4 其作用有 答出兩點(diǎn)即可 尿素 其他兩組都含有NH4NO3 能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用 NH4NO3 不能起到篩選作用 為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng) 作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定 2 2016 四川卷 10 圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程 圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列 1 圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源 鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑 產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后 其菌落周圍的指示劑將變成 色 2 在5個細(xì)菌培養(yǎng)基平板上 均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0 1mL 培養(yǎng)一段時(shí)間后 平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13 156 462 178和191 該過程采取的接種方法是 每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 108個 與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比 此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較 尿素 酚紅 紅 稀釋涂布平板法 1 75 少 3 現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活 突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸 使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼 終止密碼有UAG UGA和UAA 突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中 終止密碼為 突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含 個氨基酸 解析 1 篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源 鑒別培養(yǎng)基還需要添加酚紅作指示劑 產(chǎn)脲酶細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶可以將尿素分解成氨 導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH升高 菌落周圍的指示劑將變成紅色 UGA 115 2 圖中過程采取的接種方法是稀釋涂布平板法 每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 156 178 191 3 0 1 105 1 75 108 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法所得數(shù)據(jù)包括死的細(xì)菌 且稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)所計(jì)菌落數(shù)少于真正的活細(xì)菌數(shù) 故與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比 此計(jì)數(shù)法測得的細(xì)菌數(shù)較少 3 圖乙從起始密碼算起的堿基序列號為271 前270個堿基決定90個氨基酸 從271位到箭頭處可以決定1個氨基酸 然后插入70個核苷酸 可決定23個氨基酸 多出一個堿基 加上后面的AG剛好可以決定1個氨基酸 則后面UGA是終止密碼 因此突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA終止密碼為UGA 突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)所含氨基酸數(shù)為90 1 23 1 115 個 回答下列問題 1 該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于 若要完成步驟 該培養(yǎng)基中的成分X通常是 2 步驟 中 實(shí)驗(yàn)組的操作是 3 若在某次調(diào)查中 某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個 平板 而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落 這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了 現(xiàn)象 若將30 即36 6 個 平板作為本組菌落數(shù)的平均值 該做法 填 正確 或 不正確 牛肉膏 蛋白胨 瓊脂 將實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的 位置上 開蓋暴露一段時(shí)間 污染 不正確 解析 1 牛肉膏 蛋白胨都含有N 可為微生物的生長提供氮源 制作無菌平板所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 因此X應(yīng)為瓊脂 2 由實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?該實(shí)驗(yàn)的自變量為教室的不同高度 因變量為微生物的分布情況 故實(shí)驗(yàn)組的操作應(yīng)為將實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上 開蓋暴露一段時(shí)間 3 空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落 說明培養(yǎng)基被污染了 即調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象 實(shí)驗(yàn)過程中若培養(yǎng)基被污染 必須將其拋棄 重新制作新的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 4 2015 全國卷 已知微生物A可以產(chǎn)生油脂 微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶 脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn) 回答有關(guān)問題 1 顯微觀察時(shí) 微生物A菌體中的油脂通?？捎?染色 微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā) 可選用 填 萃取法 或 水蒸氣蒸餾法 從菌體中提取 2 為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落 可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣 并應(yīng)選用以 為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 蘇丹 或蘇丹 萃取法 油脂 3 若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù) 可在顯微鏡下用 直接計(jì)數(shù) 若要測定其活菌數(shù)量 可選用 法進(jìn)行計(jì)數(shù) 4 為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度 某同學(xué)測得相同時(shí)間內(nèi) 在35 40 45 溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg 1mg 6mg 則上述三個溫度中 條件下該酶活力最小 為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度 應(yīng)圍繞 設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn) 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 稀釋涂布平板 45 40 解析 1 油脂可被蘇丹 染液或者蘇丹 染液染成橘黃色或紅色 由于不易揮發(fā) 故采用萃取法 2 產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可以分解脂肪 故可以以脂肪為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無法生存 3 微生物B的菌體數(shù) 可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù) 測定活菌用稀釋涂布平板法 4 45 降解10g油脂所需酶量最大 故酶活性最小 40 下降解10g油脂所需酶量最小 故酶活性最大 所以要測定該酶的最適溫度 應(yīng)圍繞該溫度設(shè)計(jì)不同溫度梯度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)