（浙江專用）高考生物二輪復習 專題八 現(xiàn)代生物科技專題 第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件.ppt

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第1講基因工程和克隆技術(shù) 專題八現(xiàn)代生物科技專題 2016高考導航 專題八現(xiàn)代生物科技專題 專題八現(xiàn)代生物科技專題 1 基因工程的工具 1 限制性核酸內(nèi)切酶 來源 主要從原核生物中分離純化出來 作用a b 結(jié)果 產(chǎn)生 特異性識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列 切割兩個核苷酸之間的化學鍵 粘性末端 2 DNA連接酶作用 將具有 的兩個DNA片段連接在一起 3 質(zhì)粒 從存在位置看 在細菌中獨立于擬核之外 從化學成分上看 為雙鏈環(huán)狀DNA分子 從功能上看 能自主復制 從結(jié)構(gòu)上看 常含有抗生素抗性基因 相同粘性末端 基因文庫 較小基因 逆轉(zhuǎn)錄酶 3 將目的基因?qū)胧荏w細胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 Ca2 4 篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達 篩選 用含 的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體細胞 選擇含 的受體細胞 表達 目的基因在宿主細胞內(nèi)表達產(chǎn)生人們需要的 抗生素 重組質(zhì)粒 功能物質(zhì) 3 幾種重要的克隆技術(shù)分析 1 植物細胞培養(yǎng) 器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系 愈傷組織 器官 單個細胞 除去細胞壁 機械消化或胰蛋白酶消化 原代 傳代 細胞系 單個細胞 血清 滋養(yǎng)細胞 仙臺病毒或聚乙二醇 5 動物的克隆繁殖 命題點1基因工程及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性 目的基因的獲取 將目的基因?qū)胧荏w細胞 目的基因的檢測與鑒定 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 細胞質(zhì) 染色體DNA T DNA片段 內(nèi)部 植物組織培養(yǎng) 粘性 磷酸二酯鍵 1 目的基因應(yīng)插入啟動子與終止子之間的部位 2 將目的基因?qū)胧荏w細胞沒有堿基互補配對現(xiàn)象 3 原核生物作為受體細胞的優(yōu)點 繁殖快 多為單細胞 遺傳物質(zhì)相對較少等 4 一般情況下 用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的片段 但有時可用兩種限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因 以避免質(zhì)粒和質(zhì)粒之間 目的基因和目的基因之間的連接 5 標記基因的作用 篩選 檢測目的基因是否導入受體細胞 6 受體細胞常用植物受精卵或體細胞 經(jīng)組織培養(yǎng) 動物受精卵 一般不用體細胞 微生物 大腸桿菌 酵母菌 等 7 啟動子 DNA片段 起始密碼子 RNA 終止子 DNA片段 終止密碼子 RNA 限制酶 DNA連接酶 Ca2 感受 重組質(zhì)粒和感受態(tài)細胞 脫分化 再分化 卡那霉素 顯微注射 動物體細胞的全能性一般不能表現(xiàn) 性別鑒定 逆轉(zhuǎn)錄 限制酶 BamH 和Pst 經(jīng)研究發(fā)現(xiàn) 如果將該凝乳酶的第20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?則其催化能力將提高2倍 現(xiàn)已知通過蛋白質(zhì)工程可生產(chǎn)高效凝乳酶 請寫出有關(guān)制備步驟 找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列 定向改造凝乳酶基因 將改造后的凝乳酶基因?qū)胧荏w細胞等 答案合理即可 命題點2克隆技術(shù) 流動性 獲能 減數(shù)第二次分裂中期 促性腺激素 細胞壁 纖維素酶和果膠 離心 振動 電刺激 形成了新的細胞壁 植物組織培養(yǎng) 生長素 雜交瘤 特異性抗體 選擇 3 1 答題時不能混用的兩種細胞 重組細胞和雜交細胞 1 重組細胞 體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之后形成的細胞叫重組細胞 2 雜交細胞 動物細胞融合形成的細胞常稱為雜交細胞 2 明確單克隆抗體制備過程中的兩次篩選第一次篩選 利用特定選擇培養(yǎng)基篩選 獲得雜交瘤細胞 即AB型細胞 A為效應(yīng)B細胞 B為骨髓瘤細胞 不需要A B AA BB型細胞 第二次篩選 利用多孔板法和抗原 抗體雜交法篩選 獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞 植物組織培養(yǎng) 植物細胞的全能性 細胞分裂素 生長素 滅菌 愈傷組織 胚狀體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 灰 胚胎移植 冷凍 低溫 液氮 內(nèi)細胞團 體 乳腺 高度分化的動物細胞的細胞核具有全能性 藥物生產(chǎn) 答案合理即可 優(yōu)良種畜的培育與擴大 治療性克隆 拯救瀕危動物 答案合理 不與前一空答案重復即可 骨髓瘤細胞 抗原刺激過的B細胞 或效應(yīng)B細胞 雜交瘤細胞 2 過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的 過程 與纖維母細胞相比 誘導干細胞的全能性較 過程的實質(zhì)是 3 生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)效應(yīng)B細胞 主要原因是 脫分化 高 基因的選擇性表達 效應(yīng)B細胞高度分化 不能無限 或大量 增殖 4 處需要篩選 從而得到 細胞 且培養(yǎng)該細胞的氣體環(huán)境為 能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤 95 的空氣 5 的CO2