2019-2020年高中生物 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件制作說(shuō)明教案 新人教版必修1.doc

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2019-2020年高中生物 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件制作說(shuō)明教案 新人教版必修1 一、參賽作品類型： 本參賽課件是配套當(dāng)前在我省使用的高中生物蘇教版選修3的多媒體課件，以Powerpoint軟件制作，整合了圖片、動(dòng)畫(huà)等多種媒體形式，旨在創(chuàng)設(shè)情境，迅速有效地為學(xué)生呈現(xiàn)各類學(xué)習(xí)資源。 細(xì)胞工程是建立在對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能、生理等研究基礎(chǔ)上的新技術(shù)，本節(jié)包含其中兩項(xiàng)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)?！皢慰寺】贵w的制備”是“動(dòng)物細(xì)胞融合”技術(shù)最重要的應(yīng)用，“單克隆抗體的制備”也可以說(shuō)是一項(xiàng)具體的技術(shù)，是本節(jié)課教學(xué)的重難點(diǎn)?！皠?dòng)物細(xì)胞融合”建立在“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)”技術(shù)基礎(chǔ)上，動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程、方法、原理、意義與植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合大體相似，對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞融合的學(xué)習(xí)，怎樣與植物體細(xì)胞雜交相互比較，找出里面規(guī)律性的內(nèi)容進(jìn)行遷移，并學(xué)習(xí)新知識(shí)？如何理解單克隆抗體的概念，“單克隆”是“克隆”何種細(xì)胞？與傳統(tǒng)抗體的生產(chǎn)相比如何制備“單克隆抗體”才能使“特異性強(qiáng)、靈敏度高”？此優(yōu)點(diǎn)又是怎樣被加以應(yīng)用的？本節(jié)除涉及兩項(xiàng)技術(shù)的流程、方法，還需要體液免疫、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、動(dòng)植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異等知識(shí)，怎么將多而碎的知識(shí)點(diǎn)通過(guò)主線串聯(lián)起來(lái)？ 本節(jié)課件設(shè)計(jì)根據(jù)“用教材教，而不是教教材”的思想，努力拓寬學(xué)生科技視野，通過(guò)神舟四號(hào)飛船上舉行的“太空婚禮”——植物原生質(zhì)體融合、動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)創(chuàng)設(shè)情境，由植物體細(xì)胞雜交技術(shù)復(fù)習(xí)導(dǎo)出動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用的學(xué)習(xí)，讓學(xué)生主持太空航天動(dòng)物科研項(xiàng)目“設(shè)計(jì)單克隆抗體制備方案”，激發(fā)學(xué)生探究的熱情。在真實(shí)情境、挑戰(zhàn)性的任務(wù)驅(qū)動(dòng)下，借助單克隆抗體制備流程圖解讀，引導(dǎo)學(xué)生既關(guān)注宏觀步驟，又重視對(duì)一些重要方法細(xì)節(jié)的理解，抓住技術(shù)流程、方法和篩選主線，以問(wèn)題導(dǎo)向，啟迪學(xué)生思維，幫助學(xué)生理解單克隆抗體制備原理與應(yīng)用，培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用知識(shí)能力。 二、制作要求： 1．技術(shù)要求：本課件使用的是PPTxx制作，點(diǎn)擊播放，交互方式簡(jiǎn)單易于操作。 附本節(jié)課教學(xué)設(shè)計(jì)： 《動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體》教學(xué)設(shè)計(jì) 一、教學(xué)目標(biāo) 總：舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用。 （一）知識(shí)目標(biāo) （1）說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同。 （2）簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過(guò)程、方法與原理。 （3）了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用，并說(shuō)其應(yīng)用實(shí)例。 （二）能力目標(biāo) （1）由植物體細(xì)胞雜交導(dǎo)出動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用的學(xué)習(xí)，培養(yǎng)學(xué)生知識(shí)遷移能力； （2）讓學(xué)生進(jìn)行制備單克隆抗體的方案設(shè)計(jì)，培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)思維能力； （3）通過(guò)過(guò)程圖的解讀和有關(guān)原理和方法問(wèn)題的探討，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的學(xué)習(xí)作風(fēng)，提高理解和表達(dá)能力。 （三）情感目標(biāo) 通過(guò)創(chuàng)設(shè)讓學(xué)生主持我國(guó)航天工程空間生命科研項(xiàng)目的情境，讓學(xué)生更好地融入學(xué)習(xí)中，初步培養(yǎng)學(xué)生熱愛(ài)生命科學(xué)，勇于探索，不斷創(chuàng)新的精神。 二、教學(xué)重點(diǎn) （1）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別 （2）單克隆抗體的制備過(guò)程、方法與原理 （3）單克隆抗體應(yīng)用 三、教學(xué)難點(diǎn) 單克隆抗體的制備（篩選的方法及必要性理解）與其特異性強(qiáng)的理解（克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體） 四、課前準(zhǔn)備 （學(xué)案編制、課件制作、教學(xué)模式整理） 五、教學(xué)過(guò)程 （一）情景導(dǎo)入，復(fù)習(xí)已有知識(shí)做好鋪墊 1．學(xué)生閱讀“太空婚禮”新聞報(bào)道資料 xx年１２月３０日， 兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—有液泡的黃花煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體和脫液泡的革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在 “產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命。一段時(shí)間后，我國(guó)首批“太空娃娃”終于順利誕生。對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞融合率大大提高。 2．教師展示“神舟四號(hào)飛船” 圖片，說(shuō)明如果這次 “動(dòng)物細(xì)胞婚禮”進(jìn)展順利，人們將從雜交瘤細(xì)胞的分泌物中提取到乙肝抗體，這將為規(guī)劃未來(lái)空間藥廠提供第一手?jǐn)?shù)據(jù)。展示幾個(gè)月后已經(jīng)長(zhǎng)成的“太空煙草”和普通煙草對(duì)照?qǐng)D片。 挑戰(zhàn)自我：神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)，你能主持“太空婚禮”中的科研項(xiàng)目嗎？ 3．幫助學(xué)生回憶植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，理解為什么在太空中細(xì)胞（原生質(zhì)體）融合率會(huì)大大上升？為什么選用物理法誘導(dǎo)？分析真實(shí)實(shí)驗(yàn)操作中關(guān)鍵細(xì)節(jié)：融合后需要篩選、要獲得優(yōu)良性狀的雜種植株需要經(jīng)過(guò)鑒定與篩選。 4．讓學(xué)生填寫(xiě)“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū)，教師評(píng)價(jià) 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 原理 融合前處理 促融方法 步驟一 步驟二 步驟三 步驟四 用途 （二）學(xué)習(xí)新知 1動(dòng)物細(xì)胞融合 1．1結(jié)合問(wèn)題閱讀課本：什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？ 學(xué)生嘗試回答后，教師評(píng)價(jià)。講解動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理；動(dòng)物細(xì)胞融合概念與意義。 1．2根據(jù)體液免疫過(guò)程圖解，回答相關(guān)內(nèi)容：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？主要作用？與抗原作用的特點(diǎn)？主要分布在哪里？ 1．3閱讀資料，討論相關(guān)免疫特異性問(wèn)題，糾正“一個(gè)天然抗原是引起產(chǎn)生一種效應(yīng)B細(xì)胞和一種特異性抗體”的錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)，抗原決定簇才是引發(fā)免疫特異性細(xì)胞和物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)。 抗原決定簇是決定抗原性的特殊化學(xué)基團(tuán)。大多存在于抗原物質(zhì)的表面，有些存在于其內(nèi)部，須經(jīng)處理后才暴露出來(lái)。一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗原分子刺激淋巴細(xì)胞，說(shuō)的也就是抗原決定簇刺激B淋巴細(xì)胞，使其分裂分化出特異性的效應(yīng)B細(xì)胞，分泌特異性抗體。 1．4．通過(guò)看圖分析說(shuō)明傳統(tǒng)抗體的生產(chǎn)方法及缺陷——產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低 2單克隆抗體 2．1單克隆抗體的概念 閱讀資料，找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。 讓學(xué)生分析“單、“克隆”、“單克隆抗體”的含義。 2．2單克隆抗體的制備 2．2．1請(qǐng)學(xué)生根據(jù)所學(xué)動(dòng)物細(xì)胞融合原理提出單克隆抗體的設(shè)計(jì)方案 問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？小組討論，請(qǐng)代表發(fā)言。 提示：可以通過(guò)對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲取單克隆抗體嗎？我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？從誘變育種、基因工程、細(xì)胞工程等角度有哪些可能的設(shè)計(jì)思路？ 2．2．2介紹1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒極富創(chuàng)造性的實(shí)驗(yàn)方案與實(shí)驗(yàn)過(guò)程步驟，讓學(xué)生看書(shū)上53頁(yè)單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，分組討論，單抗制備過(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把搞亂的代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？ 2．2．3讓學(xué)生描述單克隆抗體制備過(guò)程步驟，分析包含哪些原理、哪些動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù) 2．2．4引導(dǎo)學(xué)生分析討論單克隆抗體的制備過(guò)程中的關(guān)鍵問(wèn)題與方法 問(wèn)題①注射抗原的目的是什么？②誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？③若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況？④第一次篩選出的雜交瘤細(xì)胞為何需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)？⑤實(shí)際操作中如何進(jìn)行兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？（用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，有限稀釋法培養(yǎng)進(jìn)行第二次篩選） 2．3單克隆抗體的應(yīng)用 2．3．1單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 因?yàn)閱慰寺∈强寺蝹€(gè)雜交瘤細(xì)胞，制備的是抗一種抗原決定簇的特異性單克隆抗體，因此單抗的突出優(yōu)點(diǎn)——特異性強(qiáng)、靈敏度高。 2．3．2單克隆抗體用途 由于單抗的突出優(yōu)點(diǎn)，它的最廣泛的用途是作為①診斷試劑，以“早早孕單抗試劑”來(lái)說(shuō)明其說(shuō)明其準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的特點(diǎn)。②治療、預(yù)防疾病 ③運(yùn)載藥物（ “生物導(dǎo)彈” —單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭，主要用于綠色抗癌） （三）總結(jié)歸納 補(bǔ)全“太空婚禮”科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū) 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 單克隆抗體制備 原理 融合前處理 促融方法 步驟一 步驟二 步驟三 步驟四 用途 （四）作業(yè)布置 通過(guò)報(bào)刊、雜志、互聯(lián)網(wǎng)或其他媒體搜集資料，了解細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體的新進(jìn)展，就自己感興趣的領(lǐng)域，自定選題，寫(xiě)一篇綜述報(bào)告。 附件1： “情境—問(wèn)題鏈”導(dǎo)學(xué)課堂教學(xué)模式 一、模式目標(biāo) 以學(xué)生為主體，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)熱情，使其處于愿學(xué)、樂(lè)學(xué)、會(huì)學(xué)的狀態(tài)，教師成為學(xué)生學(xué)習(xí)的引導(dǎo)者、幫助者、促進(jìn)者。 二、模式流程主要包括“自主整理—情境導(dǎo)入—問(wèn)題探究—解釋遷移—?dú)w納整合—訓(xùn)練提升”六個(gè)環(huán)節(jié)。 1、準(zhǔn)備階段-----（課前預(yù)習(xí)） 課前給學(xué)生自主預(yù)習(xí)提綱（以問(wèn)答或填充等形式），進(jìn)行本節(jié)內(nèi)容學(xué)習(xí)預(yù)備知識(shí)和基礎(chǔ)知識(shí)的整理。可以達(dá)到課前就調(diào)動(dòng)其學(xué)習(xí)的積極性，同時(shí)節(jié)省課堂時(shí)間用于重點(diǎn)知識(shí)的討論與分析，提高課堂效率。讓學(xué)生寫(xiě)出預(yù)習(xí)中發(fā)現(xiàn)的疑難問(wèn)題（2個(gè)以上），帶著問(wèn)題進(jìn)課堂。 2、導(dǎo)學(xué)階段-----（課堂完成） （1）情境導(dǎo)入 一個(gè)好的情境，是教學(xué)成功的一半。它能吸引學(xué)生的注意力，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，讓學(xué)生的思維處于活躍狀態(tài)，為探究環(huán)節(jié)提供情感動(dòng)力。情境創(chuàng)設(shè)最好具有真實(shí)性、本土性、時(shí)代感，要聯(lián)系學(xué)生生活實(shí)際，吸引學(xué)生眼球。 （2）問(wèn)題探究 情境起什么作用？問(wèn)題情境，情境創(chuàng)設(shè)是為提出與學(xué)習(xí)內(nèi)容相關(guān)的問(wèn)題，圍繞相關(guān)主線設(shè)計(jì)問(wèn)題串（如現(xiàn)代生物技術(shù)的過(guò)程或方法，科學(xué)探究思維過(guò)程等），在符合學(xué)生認(rèn)知規(guī)律的情況下展開(kāi)，要圍繞學(xué)生的最近發(fā)展區(qū)提問(wèn)，讓他“跳一跳，夠得到”，提出的問(wèn)題要有針對(duì)性，是重點(diǎn)、關(guān)鍵點(diǎn)、學(xué)生學(xué)習(xí)的難點(diǎn)、疑點(diǎn)、興奮點(diǎn)，問(wèn)題要具體、明確，任務(wù)性強(qiáng)。啟發(fā)學(xué)生通過(guò)看書(shū)、實(shí)驗(yàn)、觀察、思考、查閱資料、討論、動(dòng)手操作等活動(dòng)進(jìn)行探究性學(xué)習(xí)。 （4）解釋遷移 學(xué)生探究性學(xué)習(xí)后，做出問(wèn)題解答，教師評(píng)價(jià)或生生互評(píng)、自評(píng)。不要害怕學(xué)生暴露出來(lái)的錯(cuò)誤，錯(cuò)誤是好的教學(xué)資源。（教學(xué)生學(xué)會(huì)、教學(xué)生學(xué)、教學(xué)生會(huì)學(xué)）教師要有針對(duì)性地聚焦重點(diǎn)、突破難點(diǎn)、厘清疑點(diǎn)，對(duì)問(wèn)題進(jìn)行精要的解釋，以此糾正一部分學(xué)生模糊的知識(shí)，幫助學(xué)生形成正確概念。進(jìn)行變式訓(xùn)練，促進(jìn)知識(shí)遷移。 （3）歸納整合 對(duì)知識(shí)進(jìn)行歸納、整理，使形成系統(tǒng)明晰的知識(shí)結(jié)構(gòu)。教師要努力總結(jié)揭示知識(shí)背后的規(guī)律、方法。 3、應(yīng)用評(píng)價(jià)階段----訓(xùn)練提升（課堂或課后完成） 呈現(xiàn)體現(xiàn)本節(jié)內(nèi)容的典型練習(xí)題，最好是新情境下的信息題，以檢測(cè)學(xué)習(xí)效果（是否真正理解和掌握），鞏固內(nèi)化新知識(shí)，形成運(yùn)用知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。 以試卷、作業(yè)的形式檢查學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)任務(wù)的掌握情況。最好在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，當(dāng)堂完成。當(dāng)堂反饋，便于掌握學(xué)生在課堂上的真實(shí)學(xué)情，檢測(cè)自己的教學(xué)質(zhì)量，及時(shí)查漏補(bǔ)缺。 “情境—問(wèn)題鏈”導(dǎo)學(xué)模式需要精心開(kāi)發(fā)的課程資源做支撐，一定要樹(shù)立“用教材教，而不是教教材的思想”、“留心處處皆資源”。 總之，“情境—問(wèn)題鏈”導(dǎo)學(xué)模式是努力開(kāi)發(fā)營(yíng)造寬松、愉悅、樂(lè)學(xué)的環(huán)境，引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)、獨(dú)立思考、積極探究，使學(xué)生在輕松愉快的氛圍中體驗(yàn)到學(xué)習(xí)成功的樂(lè)趣，感受創(chuàng)新的快樂(lè)。 附件2： 《動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體》課前預(yù)習(xí)提綱 學(xué)校 班級(jí) 姓名 一、問(wèn)答 1．植物體細(xì)胞雜交包括哪些步驟？原生質(zhì)體融合前應(yīng)如何處理？促進(jìn)融合的方法有哪些? 融合的原理是什么？ 2．抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？主要作用？與抗原作用的特點(diǎn)？主要分布在哪里？ 3．動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)有哪些？單克隆抗體制備過(guò)程中用到哪些？技術(shù)原理是什么？ 4．仔細(xì)閱讀書(shū)上單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，回答問(wèn)題①注射抗原的目的是什么？②誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？③若細(xì)胞兩兩融合，有幾種融合情況？④進(jìn)行專一抗體檢測(cè)和篩選的目的是什么？⑤篩選最少要進(jìn)行幾次？ 二、填空 1、動(dòng)物細(xì)胞融合的原理 ，誘導(dǎo)其融合的手段 ，最主要用途 。 2、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn) 、 。 3、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 。 4、單克隆抗體主要用途 。 三、請(qǐng)寫(xiě)出預(yù)習(xí)中你自己不能解決的疑難問(wèn)題（2個(gè)以上） 附件3： 《動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體》課后檢測(cè)題 1．中科院上海植物生理生態(tài)研究所在“神舟四號(hào)”飛船進(jìn)入太空后為一對(duì)“新人”——黃花煙草原生質(zhì)體和革新一號(hào)煙草原生質(zhì)體舉辦了特殊的“婚禮”。將兩個(gè)“新人”放入融合器中，當(dāng)充滿液體的融合器加上直流電場(chǎng)，兩個(gè)原本相互游離的細(xì)胞一下子貼到一起，開(kāi)始了“竊竊私語(yǔ)”。緊接著，在瞬間高壓脈沖的作用下，細(xì)胞膜被擊出了一個(gè)小孔，透過(guò)這微小的空間，兩股細(xì)胞質(zhì)展開(kāi)了“心靈溝通”。漸漸地，它們倆已是你中有我，我中有你，一個(gè)新生命就這樣誕生了。地面實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：用于融合的兩個(gè)“新人”，一個(gè)開(kāi)的是粉花（標(biāo)記為“一號(hào)”），一個(gè)開(kāi)的是黃花（標(biāo)記為“二號(hào)”）融合后的細(xì)胞再生植株開(kāi)的是黃花，但形狀卻和一號(hào)相同（稱“一號(hào)形狀”，另一個(gè)稱“二號(hào)形狀”）。這種“太空煙草”比普通煙草個(gè)子矮，株稈粗，煙葉多，是我國(guó)太空育種試驗(yàn)的一項(xiàng)重大成果。據(jù)此回答下列問(wèn)題： （1）由于細(xì)胞的密度不同，因此在地面上進(jìn)行細(xì)胞融合非常困難。從理論上講，在太空中細(xì)胞更容易融合，可能的原因是 。在顯微鏡下觀察，“新人”的細(xì)胞膜融合在一起，使細(xì)胞呈圓球狀，這是因?yàn)槟ぞ哂? 特性?！凹?xì)胞婚禮”中用到的誘導(dǎo)融合技術(shù)是 。 （2）兩種煙草原生質(zhì)體融合時(shí)， 類型是要被淘汰的。 類型是我們需要的，這樣的細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)后，再生的植株屬 倍體。 （3）植物體細(xì)胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比，其優(yōu)點(diǎn)是 。 （4）“太空煙草”能穩(wěn)定遺傳嗎？為什么？ 2．下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。 （1） 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。 （2）在圖中HAT培養(yǎng)上，未有融合的_________________和融合的_________________ 都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。 （3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最主要的優(yōu)點(diǎn)是 _________ 。 （4）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速 特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的_________ 特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行______________和___________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或小鼠腹腔內(nèi)增殖，從________________或________________中，就可以提取出大量的單克隆抗體了。 （5）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體 中的 細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。 3．已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答： （1）試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有 種融合細(xì)胞。 （2）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說(shuō)原理。 方法： 。 原理： 。 細(xì)胞株 人染色體編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 A株 ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － B株 ＋ ＋ － － ＋ ＋ － － C株 ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － （3）將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培 養(yǎng)，獲得A、B、C三細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi) 含有的人染色體如有表（“+”有，“—”無(wú)） 測(cè)定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活 性。結(jié)果是：①B株有a酶活性；②A、B、 C株均有b酶活性：③A、B株有c酶活性； ④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無(wú)e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的 、 、 、 和 號(hào)染色體上。 答案 1．（1）重力作用很弱 一定的流動(dòng)性 電刺激誘導(dǎo)融合 （2）自身融合 黃花煙草——某新一號(hào)煙草 多（或四） （3）克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 （4）如果“太空煙草”為純合子，無(wú)性繁殖和有性繁殖都能穩(wěn)定遺傳；如果為雜合子，無(wú)性繁殖能穩(wěn)定遺傳，有性繁殖會(huì)出現(xiàn)性狀分離。培養(yǎng)過(guò)程中也可能會(huì)發(fā)生基因突變。 2.(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2) 親本細(xì)胞 具有同種核的細(xì)胞 (3)特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可能大量制備 (4)大量增殖 分泌專一抗體 克隆化培養(yǎng) 抗體檢測(cè) 細(xì)胞培養(yǎng)液 小鼠腹水 (5)骨髓 造血干 3．（1）2 （2）培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞 加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖 （3）6 1 2 7 8 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1、動(dòng)物細(xì)胞融合 （1）概念：動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。 （2）過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。 （3）動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。 2、單克隆抗體 （1）抗體：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 （2）單克隆抗體的制備過(guò)程 說(shuō)明： （1）融合形成的雜交細(xì)胞有多種，若僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合，僅有3種情況。 （2）整個(gè)制備過(guò)程要經(jīng)過(guò)兩次篩選。第一次用特定的選擇培養(yǎng)基從融合的細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞。第二次在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。 （3）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。 （4）單克隆抗體是指通過(guò)克隆雜交瘤細(xì)胞，形成遺傳物質(zhì)完全相同的細(xì)胞群，由該細(xì)胞群產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。 （5）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。 3、單克隆抗體的應(yīng)用 ① 作為診斷試劑：具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ② 用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療，可制成“生物導(dǎo)彈”，也有少量用于治療其它疾病。