2019-2020年高中生物 隨堂達標檢測 5.3 血紅蛋白的提取和分離（含解析）新人教版選修1.doc

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2019-2020年高中生物 隨堂達標檢測 5.3 血紅蛋白的提取和分離（含解析）新人教版選修1 1．用凝膠色譜法分離蛋白質時，相對分子質量大的蛋白質 (　　)。 A．路程較長，移動速度較慢 B．路程較長，移動速度較快 C．路程較短，移動速度較慢 D．路程較短，移動速度較快 解析　凝膠顆粒內部有許多貫穿的通道，當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時，相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程較長，移動速度較慢；而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。 答案　D 2．(2011南通調研)下列關于蛋白質提取和分離實驗中樣品處理步驟的描述，正確的是 (　　)。 A．紅細胞的洗滌：加入蒸餾水，緩慢攪拌，低速短時間離心 B．血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分攪拌 C．分離血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心，過濾后，用分液漏斗分離 D．透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12 h 解析　紅細胞洗滌步驟中應加入生理鹽水而不是蒸餾水，血紅蛋白釋放中加入蒸餾水，透析時緩沖液pH應為7.0而不是4.0。 答案　C 3．下列各項中不屬于電泳使樣品中各分子分離的原因的是 (　　)。 A．分子帶電性質的差異 B．分子的大小 C．分子的形狀 D．分子的變性溫度 解析　電泳是指帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程，樣品分子的帶電性質不同、分子的大小和形狀不同都會影響帶電粒子在電場中的遷移速度，與分子的變性溫度無關，故選D項。 答案　D 4．下列有關提取和分離血紅蛋白的程序敘述錯誤的是 (　　)。 A．樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液 B．通過透析可以去除樣品中相對分子質量較大的雜質，此為樣品的粗提取 C．可通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去，即樣品的純化 D．可通過SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度 解析　首先通過洗滌紅細胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品的處理；再經過透析去除相對分子質量較小的雜質，即樣品的粗分離；然后通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去，即樣品的純化；最后經SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定，由此可知B的敘述錯誤。由玻璃紙制成的透析袋能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內，透析可以去除樣品中相對分子質量較小的雜質。 答案　B 5．下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入(圖I)和洗脫(圖Ⅱ)示意圖，請據圖回答下列問題。 (1)在加樣示意圖中，正確的加樣順序是_____________________________。 (2)用吸管加樣時，應注意正確操作，分別是①_________________________、 ②貼著管壁加樣、③________________________________________。 (3)等樣品______________________時，才加入緩沖液，待__________________接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每 ________mL收集一管，連續(xù)收集。 解析　加樣品時應嚴格按要求進行操作，吸管應貼著管壁，管口沿著管壁環(huán)繞移動，還應注意不要破壞凝膠面。等樣品完全進入到凝膠層時，才加入緩沖液進行洗脫。 答案　(1)④→①→②→③ (2)不要破壞凝膠面　使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動 (3)完全進入凝膠層　紅色的蛋白質　5 課堂小結