2019版高考生物一輪復習 第十一單元 第1講 基因工程練習 新人教版.doc
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第1講 基因工程 [課時作業(yè)] 單獨成冊 方便使用 1.(2018河北衡水調(diào)研)請回答利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物的相關問題: (1)培育轉(zhuǎn)基因植物過程的核心步驟是__________,其目的是使目的基因在受體細胞中__________,并且可以通過復制遺傳給下一代,同時,使目的基因表達和發(fā)揮作用。 (2)構(gòu)建基因表達載體時,可利用DNA連接酶連接被限制酶切開的__________鍵?;虮磉_載體的組成部分包括啟動子、終止子、目的基因、__________、復制原點等。 (3)組成基因表達載體的單體是__________?;虮磉_載體中的啟動子是__________識別和結(jié)合的部位,這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過__________(填過程)合成mRNA。 (4)用兩種限制酶XbaⅠ和SacⅠ(兩種酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,獲得含目的基因的片段。若利用該片段構(gòu)建基因表達載體,應選用的Ti質(zhì)粒是如圖中的__________。 注:圖中箭頭所指的位置是限制酶識別和切割的位點 解析:(1)基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體,目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并可以通過復制遺傳給下一代,同時使目的基因表達和發(fā)揮作用。(2)限制酶切開磷酸二酯鍵,DNA連接酶連接形成磷酸二酯鍵,基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因和復制原點。(3)基因表達載體的單體是脫氧核苷酸,啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,結(jié)合后啟動基因的轉(zhuǎn)錄。(4)目的基因兩端需要用限制酶XbaⅠ和SacⅠ切割,且目的基因必須連接到TDNA中,故甲符合要求。 答案:(1)構(gòu)建基因表達載體 穩(wěn)定存在 (2)磷酸二酯 標記基因 (3)脫氧核苷酸 RNA聚合酶 轉(zhuǎn)錄 (4)甲 2.閱讀如下資料: 資料甲:科學家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫阎?,得到了體型巨大的“超級小鼠”;科學家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。 資料乙:T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性??茖W家對編碼T4溶菌酶的基因進行了改造,使其表達的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵,提高了T4溶菌酶的耐熱性。 資料丙:兔甲和兔乙是同一物種的兩個雌性個體,科學家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙體內(nèi),成功產(chǎn)出兔甲的后代,證實了同一物種的胚胎可在不同個體的體內(nèi)發(fā)育。 回答下列問題: (1)資料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達載體導入小鼠的受精卵中常用________________法。構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶是________________和________________。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時,常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)資料乙中的技術屬于________________工程的范疇,該工程是指以分子生物學相關理論為基礎,通過基因修飾或基因合成,對________進行改造,或制造一種________的技術。在該實例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的________序列發(fā)生了改變。 (3)資料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到________種的、生理狀態(tài)相同的另一個雌性動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育成新個體的技術。在資料丙的實例中,兔甲稱為________體,兔乙稱為________體。 解析:(1)將目的基因?qū)雱游锛毎S蔑@微注射法;構(gòu)建基因表達載體需要限制性核酸內(nèi)切酶對目的基因所在的DNA和載體進行切割,還需要DNA連接酶將目的基因與載體結(jié)合;農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上,故可用農(nóng)桿菌感染植物,將目的基因?qū)胫参锛毎?2)資料乙中的技術屬于蛋白質(zhì)工程的范疇,通過改造基因,對T4溶菌酶這種蛋白質(zhì)進行了改造,使組成該酶的氨基酸序列發(fā)生了改變,從而提高了T4溶菌酶的耐熱性。(3)由于同一物種的生理特性相同,因此進行胚胎移植時,受體與供體物種相同,易于成功;兔甲是提供胚胎的個體,稱為供體,兔乙是接受胚胎的個體,稱為受體。 答案:(1)顯微注射 限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 農(nóng)桿菌可感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中 (2)蛋白質(zhì) 現(xiàn)有的蛋白質(zhì) 新蛋白質(zhì) 氨基酸 (3)同 供 受 3.鐮刀型細胞貧血癥是一種單基因遺傳病,患者的血紅蛋白分子β肽鏈第6位氨基酸——谷氨酸被纈氨酸代替,導致功能異常?;卮鹣铝袉栴}: (1)異常血紅蛋白的氨基酸序列改變的根本原因是編碼血紅蛋白基因的__________序列發(fā)生改變。 (2)將正常的血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉毎?,可以合成正常的血紅蛋白達到治療的目的。此操作__________(填“屬于”或“不屬于”)蛋白質(zhì)工程,理由是該操作________________________________________________________________________。 (3)用基因工程方法制備血紅蛋白時,可先提取早期紅細胞中的__________,以其作為模板,在__________酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。cDNA與載體需在__________酶的作用下,拼接構(gòu)建基因表達載體,導入受體菌后進行表達。 (4)檢測受體菌是否已合成血紅蛋白,可從受體菌中提取__________,用相應的抗體進行__________雜交,若出現(xiàn)雜交帶,則表明該受體菌已合成血紅蛋白。 解析:(1)基因是具有遺傳效應的DNA片段,遺傳信息儲存在基因堿基對的排列順序中。(2)蛋白質(zhì)工程是指通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求,故題中所述不屬于蛋白質(zhì)工程。(3)利用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因時,需先提取mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。cDNA與載體需要在限制酶和DNA連接酶的作用下拼接構(gòu)建基因表達載體,才可導入受體菌。(4)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),需要從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應的抗體進行抗原—抗體雜交。 答案:(1)堿基對 (2)不屬于 沒有對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造 (3)mRNA 逆轉(zhuǎn)錄 限制酶和DNA連接 (4)蛋白質(zhì) 抗原—抗體 4.(2018山東淄博模擬)利用生物工程技術可從轉(zhuǎn)基因奶山羊乳汁中分離獲得人凝血因子Ⅳ,用于血友病的治療。請回答下列問題: (1)根據(jù)凝血因子Ⅳ基因上游和下游的堿基序列,可用__________技術獲取并擴增基因。構(gòu)建該基因表達載體時,所用到的工具酶是____________________________________, 該基因表達載體中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分別是 ________________________________________________________________________。 (2)將目的基因表達載體導入奶山羊受精卵的常用方法是__________。受體細胞選用受精卵的優(yōu)點是細胞大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)含量高和___________________________________。 (3)在體外胚胎培養(yǎng)時,應選用囊胚的__________進行DNA分析,用于選擇雌性胚胎。此期的胚胎也適于胚胎分割移植,此技術的優(yōu)點是________________________________________________________________________。 (4)人凝血因子Ⅳ是一種胞外酶,該蛋白的加工是在__________等細胞器上進行的。人凝血因子Ⅳ只在乳腺細胞合成的原因是________________________________________。 解析:(1)可利用PCR技術擴增目的基因;構(gòu)建該基因表達載體時,通常用同種限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體,再用DNA連接酶將目的基因與切開的運載體連接起來,因此所用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。凝血因子Ⅳ基因為目的基因,在基因表達載體中,啟動子位于目的基因的首端,終止子位于目的基因的尾端。(2)顯微注射技術是將目的基因?qū)雱游锛毎某S梅椒?;受精卵作為受體細胞的優(yōu)點是細胞全能性高,細胞大易操作、營養(yǎng)物質(zhì)含量高等。(3)在體外胚胎培養(yǎng)時,可選取囊胚的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎分割有利于提高胚胎的利用率,胚胎移植可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。(4)分泌蛋白是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器上進行加工的;基因的選擇性表達使人凝血因子Ⅳ只在乳腺細胞合成。 答案:(1)PCR 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 啟動子和終止子 (2)顯微注射法 細胞全能性高 (3)滋養(yǎng)層細胞 充分發(fā)揮雌性動物的繁殖潛力(或快速大量繁殖) (4)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 基因的選擇性表達 5.(2018廣西桂林調(diào)研)將外源基因整合到葉綠體基因組中并成功表達,這就是葉綠體轉(zhuǎn)基因技術,該技術能有效改良植物的品質(zhì),請回答下列問題: (1)若要在短時間內(nèi)大量擴增外源基因,可采用PCR技術,該技術利用了__________的原理。 (2)對大多數(shù)高等植物而言,與傳統(tǒng)的細胞核轉(zhuǎn)基因相比,葉綠體轉(zhuǎn)基因更穩(wěn)定,因其不會隨__________(填“花粉”或“卵細胞”)傳給后代,從而保持了__________(填“父本”或“母本”)的遺傳特性。 (3)利用________________處理植物體細胞可得到原生質(zhì)體,再通過__________法將目的基因?qū)朐|(zhì)體,當原生質(zhì)體再長出______時,便可通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)出相應的轉(zhuǎn)基因幼苗。 (4)一個完整的基因表達載體應該包括啟動子、________________等,啟動子位于基因的首端,它是__________________________,有它才能啟動基因轉(zhuǎn)錄。 解析:(1)PCR技術的原理是DNA雙鏈復制。(2)葉綠體基因只能隨母本產(chǎn)生的卵細胞遺傳,不能隨花粉遺傳給后代,從而保持了母本的遺傳特性。(3)根據(jù)酶的專一性,用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞的細胞壁,受體細胞為植物細胞時,常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或基因槍法將目的基因?qū)胧荏w細胞。(4)一個完整的基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因和復制原點,啟動子是RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位。 答案:(1)DNA雙鏈復制 (2)花粉 母本 (3)纖維素酶和果膠酶 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍) 細胞壁 (4)目的基因、標記基因、終止子 RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位 6.家蠶細胞具有高效表達目的基因的能力,科研人員將人的干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并進行大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。 (1)某限制酶能專一性地識別DNA上GAATTC序列,并在特定位點切割某化學鍵,該化學鍵的名稱是__________。 (2)人的干擾素基因一般來自cDNA文庫,其屬于__________(填“基因組”或“部分基因”)文庫。 (3)基因工程操作過程的核心步驟是_______________________________________。 啟動子位于基因的__________,是__________識別和結(jié)合的部位。 (4)將目的基因?qū)爰倚Q細胞的常用方法是___________________________________。 目的基因?qū)胧荏w細胞后,首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物________________,這是目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵。 (5)通過PCR技術可大量獲取目的基因,PCR技術的原理是__________。 解析:(1)限制酶可識別和切割DNA片段中特定的磷酸二酯鍵。(2)cDNA是利用mRNA反轉(zhuǎn)錄得到的,只含有該生物的部分基因。(3)啟動子位于目的基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。(4)將目的基因?qū)雱游锛毎S玫姆椒ㄊ秋@微注射法,目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是轉(zhuǎn)基因生物的(染色體)DNA是否插入了目的基因。(5)PCR技術利用了體內(nèi)DNA復制的原理大量擴增目的基因。 答案:(1)磷酸二酯鍵 (2)部分基因 (3)基因表達載體的構(gòu)建 首端 RNA聚合酶 (4)顯微注射法 (染色體)DNA是否插入了目的基因 (5)DNA復制 7.科學家通過利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因,提高了光合作用過程中Rubisco酶對CO2的親和力,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題: (1)PCR過程所依據(jù)的原理是__________,利用PCR技術擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成__________;擴增過程需要加入__________酶。 (2)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,其作用是________________。目的基因能在不同生物體內(nèi)正常表達原來的蛋白質(zhì),說明整個生物界__________。 (3)可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體。常用__________將基因表達載體導入植物細胞,還需用到植物細胞工程中的__________技術,來最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。 解析:(1)PCR依據(jù)的原理是DNA雙鏈復制原理,要依據(jù)目的基因兩端已知的脫氧核苷酸序列合成引物,擴增過程需要加入耐高溫的DNA聚合酶(或Taq酶)。(2)啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,能驅(qū)動轉(zhuǎn)錄出mRNA;因生物界共用一套遺傳密碼,所以目的基因可以在不同細胞內(nèi)表達合成出相同的蛋白質(zhì)。(3)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達載體導入受體細胞,借助于植物組織培養(yǎng)技術,獲得轉(zhuǎn)基因植物。 答案:(1)DNA雙鏈復制 引物 耐高溫的DNA聚合(或Taq) (2)RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄出mRNA 共用一套密碼子 (3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) 8.通過基因工程的方法,科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并獲得成功表達。棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡?;ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵咐弥参锘ǚ勖劝l(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊,進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中,借助天然的種胚系統(tǒng),形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題: (1)基因工程中常用的“剪刀”是指__________;常用的“針線”是指__________。 (2)利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁毎?,此過程是基因工程操作步驟中的第三步,即__________,又稱為__________。獲取目的基因時,如果基因比較小,__________已知,則可以通過DNA合成儀用化學方法直接合成。 (3)該目的基因在導入受體細胞前需要與載體結(jié)合,目前經(jīng)常使用的載體是__________,重組的該結(jié)構(gòu)除了目的基因之外,還有__________、__________、__________和復制原點等結(jié)構(gòu)。這是基因工程操作步驟中的第二步,該步驟是基因工程的__________。 (4)基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定,其中分子水平的檢測又分三步:首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技術是__________;其次還要檢測__________,方法同樣是采用分子雜交技術;最后檢測__________,方法是__________雜交技術。 (5)為了使毒蛋白只出現(xiàn)在棉花葉肉細胞中,在進行基因工程第二步時應該加上__________等調(diào)控組件。 解析:(1)基因工程中常用的“剪刀”是指限制酶;常用的“針線”是指DNA連接酶,連接目的基因和運載體形成重組DNA。(2)基因工程的基本操作步驟主要包括四步:①目的基因的獲??;②基因表達載體的構(gòu)建;③將目的基因?qū)胧荏w細胞;④目的基因的檢測與鑒定。其中目的基因?qū)胧荏w細胞屬于第三步,即轉(zhuǎn)化過程;在獲取目的基因時,如果目的基因比較小,核苷酸序列又已知,則可以通過DNA合成儀人工合成。(3)基因工程中最常用的運載體是質(zhì)粒,可以將目的基因?qū)胧荏w細胞。構(gòu)建基因表達載體是基因工程的核心步驟,該表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(4)DNA上是否插入了目的基因的檢測方法是DNA分子雜交技術;目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA的檢測方法是分子雜交技術;目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的檢測方法是抗原—抗體雜交技術。(5)為了使毒蛋白只出現(xiàn)在棉花葉肉細胞中,應在目的基因前加上葉肉蛋白基因啟動子,構(gòu)建成基因表達載體。 答案:(1)限制酶 DNA連接酶 (2)將目的基因?qū)胧荏w細胞 轉(zhuǎn)化 核苷酸序列 (3)質(zhì)?!幼印〗K止子 標記基因 核心 (4)DNA分子雜交技術 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗原—抗體 (5)葉肉蛋白基因啟動子 9.回答以下有關基因工程的知識: (1)獲取目的基因時,可從基因文庫中直接提取,而基因文庫包括________和________,其中要用到反轉(zhuǎn)錄技術的是________。 (2)構(gòu)建基因表達載體時,用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒載體可產(chǎn)生“”的片段,該限制酶識別的核苷酸序列是__________________,用限制酶Ⅱ切割含有目的基因的DNA,兩種酶切割DNA產(chǎn)生的末端能拼接在一起,則限制酶Ⅱ必須具有________的特點。 (3)將目的基因?qū)胧荏w細胞時,如果受體細胞是水稻(單子葉植物)細胞,則常用的方法是______________;如果受體細胞是大腸桿菌,則需要用鈣離子處理,處理后的細胞具有______________的特點。 (4)檢測與鑒定目的基因時,檢測目的基因在真核細胞中能否穩(wěn)定遺傳的關鍵是______________。鑒定目的基因是否成功表達,除了分子水平檢測外,還可以從________水平進行鑒定。 解析:cDNA文庫中的DNA是由mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成的;一個完整的基因表達載體包括啟動子、終止子、標記基因、目的基因和復制原點等;將目的基因?qū)雴巫尤~植物細胞內(nèi)常用的方法是基因槍法。 答案:(1)基因組文庫 部分基因文庫(如cDNA文庫) cDNA文庫 (2) 切割產(chǎn)生的DNA片段末端與限制酶Ⅰ切割產(chǎn)生的相同 (3)基因槍法 容易從周圍環(huán)境吸收DNA分子 (4)檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入了目的基因 (生物)個體- 配套講稿:
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