高三生物一輪復(fù)習(xí) 專題1 基因工程課件.ppt

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走向高考 生物 路漫漫其修遠(yuǎn)兮吾將上下而求索 人教版 高考總復(fù)習(xí) 現(xiàn)代生物科技專題 選修三 選考內(nèi)容 專題一基因工程 選修三 考情考點(diǎn)探究 方法警示探究 課前基礎(chǔ)回扣 核心考點(diǎn)突破 課時(shí)作業(yè) 方法技巧警示 1 2014 江蘇 23 下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述 錯(cuò)誤的是 A 切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列B PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C 載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D 抗蟲(chóng)基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)答案ABC 解析本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí) 不同的限制性核酸內(nèi)切酶特異性地識(shí)別不同核苷酸序列 A錯(cuò)誤 PCR反應(yīng)中 起初的90 95 高溫是使目的基因解旋 后冷卻至50 左右是使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上 最后再加熱至72 左右是讓DNA聚合酶催化DNA的子鏈延伸 B錯(cuò)誤 載體質(zhì)粒通常采用抗生素抗性基因作為篩選標(biāo)記基因 C錯(cuò)誤 基因成功插入也未必會(huì)表達(dá) D正確 解答此類題目一定要準(zhǔn)確把握基因工程的步驟 基因工程的工具 2 2014 廣東 25 利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶 CarE 制劑的流程如圖所示 下列敘述正確的是 A 過(guò)程 需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B 過(guò)程 需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C 過(guò)程 使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D 過(guò)程 可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞 答案AD解析通過(guò)流程圖分析 考查基因工程的操作程序 基因工程操作過(guò)程中 過(guò)程 為逆轉(zhuǎn)錄 需要逆轉(zhuǎn)錄酶 過(guò)程 為PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 該過(guò)程應(yīng)用高溫使DNA雙螺旋解開(kāi) 不需要解旋酶 過(guò)程 為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 以大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí) 常用的方法就是利用氯化鈣溶液處理大腸桿菌 使之成為感受態(tài)細(xì)胞 利于基因表達(dá)載體進(jìn)入受體細(xì)胞 導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌就成為工程菌 因此 過(guò)程 為目的基因的檢測(cè) 檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入大腸桿菌的第一步是用DNA分子雜交法 3 2014 天津 4 為達(dá)到相應(yīng)目的 必須通過(guò)分子檢測(cè)的是 A 攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B 產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素 8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C 轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定D 21三體綜合征的診斷答案B 解析本題考查基因工程 細(xì)胞工程與變異的有關(guān)實(shí)驗(yàn)篩選診斷問(wèn)題 攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選可利用含鏈霉素選擇性培養(yǎng)基篩選 必需利用抗原 抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素的雜交瘤細(xì)胞 轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定可采用個(gè)體生物學(xué)水平的飼喂法進(jìn)行檢測(cè) 利用顯微鏡檢測(cè)21三體綜合征 4 2014 重慶 4 如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖 以下相關(guān)敘述 正確的是 A 的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B 侵染植物細(xì)胞后 重組Ti質(zhì)粒整合到 的染色體上C 的染色體上若含抗蟲(chóng)基因 則 就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D 只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異答案D 解析本題考查基因工程的操作程序及有關(guān)問(wèn)題 是Ti質(zhì)粒 作為目的基因的運(yùn)輸載體 基因表達(dá)載體 構(gòu)建載體需要限制酶和DNA連接酶 A錯(cuò)誤 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 侵染植物細(xì)胞后 重組Ti質(zhì)粒上的T DNA整合到 的染色體上 B錯(cuò)誤 導(dǎo)入基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞 染色體上含有目的基因 但目的基因可能不能轉(zhuǎn)錄或者不能翻譯 或者表達(dá)的蛋白質(zhì)不具有生物活性 因此不一定產(chǎn)生具有生物活性的蛋白質(zhì) C錯(cuò)誤 轉(zhuǎn)基因生物 植株表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀 說(shuō)明含有目的基因 且基因得到表達(dá) 該過(guò)程的遺傳實(shí)質(zhì)屬于基因重組 為可遺傳變異 D正確 本題知識(shí)中 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法 目的基因的檢測(cè)與表達(dá)是重要的考查點(diǎn) 一 基因工程的概念理解1 供體 提供 2 操作環(huán)境 3 操作水平 4 原理 5 受體 表達(dá)目的基因 6 本質(zhì) 性狀在 體內(nèi)表達(dá) 7 優(yōu)點(diǎn) 1 與雜交育種相比 克服了 的障礙 2 與誘變育種相比 改造生物遺傳性狀 目的基因 體外 分子水平 基因重組 受體 遠(yuǎn)緣雜交不親和 定向 二 DNA重組技術(shù)的基本工具1 限制性核酸內(nèi)切酶 簡(jiǎn)稱 1 來(lái)源 主要是從 生物中分離純化出來(lái)的 2 作用 識(shí)別特定的 并切開(kāi)相應(yīng)兩個(gè)核苷酸之間的 3 結(jié)果 產(chǎn)生 或平末端 2 DNA連接酶 1 種類 按來(lái)源可分為E coliDNA連接酶和T4DNA連接酶 2 作用 在兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二酯鍵以連接 限制酶 原核 核苷酸序列 磷酸二酯鍵 黏性末端 兩段DNA片段 質(zhì)粒 限制酶切割位點(diǎn) 標(biāo)記基因 基因 基因文庫(kù) PCR技術(shù) 2 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 基因工程的核心 1 基因表達(dá)載體的組成 啟動(dòng)子 終止子 啟動(dòng)子 a 位置 位于 b 作用 是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位 驅(qū)動(dòng)基因 最終獲得所需要的蛋白質(zhì) 終止子 a 位置 位于基因的尾端 b 作用 使 在所需要的地方停止下來(lái) 目的基因 標(biāo)記基因 基因的首端 轉(zhuǎn)錄出mRNA 轉(zhuǎn)錄 2 構(gòu)建目的 使目的基因在 中穩(wěn)定存在 并且可以遺傳給下一代 使 能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 3 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1 轉(zhuǎn)化 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi) 并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持 的過(guò)程 受體細(xì)胞 目的基因 穩(wěn)定和表達(dá) 4 目的基因的檢測(cè)與鑒定 目的基因是否轉(zhuǎn)錄 抗原 抗體雜交技術(shù) 分子 目的基因是否表達(dá) 四 基因工程的應(yīng)用1 轉(zhuǎn)基因植物植物基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力 如抗除草劑 抗蟲(chóng) 抗病 和抗鹽堿等 以及改良 和利用植物 等方面 2 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物動(dòng)物基因工程在動(dòng)物品種改良 建立 器官移植等方面顯示了廣闊的應(yīng)用前景 抗干旱 農(nóng)作物的品質(zhì) 生產(chǎn)藥物 生物反應(yīng)器 3 基因工程藥物 1 來(lái)源 轉(zhuǎn)基因的 2 成果 細(xì)胞因子 抗體 疫苗 激素等 3 作用 用來(lái)預(yù)防和治療人類腫瘤 心血管疾病 各種傳染病 糖尿病 類風(fēng)濕等疾病 4 基因治療 1 方法 把 導(dǎo)入病人體內(nèi) 使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能 2 效果 治療 的最有效的手段 3 分類 和體外基因治療 工程菌 遺傳病 正常基因 遺傳病 體內(nèi)基因治療 五 蛋白質(zhì)工程1 概念理解 1 基礎(chǔ) 蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系 2 操作 或基因合成 3 結(jié)果 改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出 4 目的 滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求 2 操作過(guò)程從預(yù)期的 出發(fā) 設(shè)計(jì)預(yù)期的 推測(cè)應(yīng)有的 找到相對(duì)應(yīng)的 基因 基因表達(dá) 產(chǎn)生需要的蛋白質(zhì) 基因修飾 新的蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)功能 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 氨基酸序列 脫氧核苷酸序列 DNA連接酶和DNA聚合酶的作用是何區(qū)別 提示 DNA連接酶連接的是DNA片段 恢復(fù)被限制酶切開(kāi)了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 DNA聚合酶是DNA復(fù)制時(shí)連接脫氧核苷酸的酶 1 天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花 這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B 而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B 現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰 下列操作正確的是 A 提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA 經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA 再擴(kuò)增基因BB 利用限制性核酸內(nèi)切酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC 利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D 將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌 然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞 答案A解析提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA 逆轉(zhuǎn)錄得到DNA 然后擴(kuò)增 可獲得大量的基因B A正確 從基因文庫(kù)中獲取目的基因 只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫(kù)中的信息進(jìn)行篩選對(duì)比即可 不需要用限制酶進(jìn)行切割 B錯(cuò)誤 目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶 而不是DNA聚合酶 C錯(cuò)誤 目的基因需要和運(yùn)載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入 而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進(jìn)行感染 而不是大腸桿菌 D錯(cuò)誤 2 從某海洋動(dòng)物中獲得 基因 其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌體和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1 目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物 首先要做的是 A 合成編碼目的肽的DNA片段B 構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體C 依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽D 篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽答案C 解析本題考查了蛋白質(zhì)工程的操作過(guò)程 該題目屬于蛋白質(zhì)工程 已經(jīng)獲得該目的基因片段 不需要合成編碼目的肽的DNA片段 故A錯(cuò)誤 是需要構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體 但這不是第一步 故B錯(cuò)誤 蛋白質(zhì)工程的第一步是根據(jù)蛋白質(zhì)的功能 設(shè)計(jì)P1氨基酸序列 從而推出其基因序列 故C正確 該基因表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌體和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1 目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物 而目的多肽是抗菌性強(qiáng)但溶血性弱 所以必需對(duì)其改造 保持其抗菌性強(qiáng) 抑制其溶血性 故D錯(cuò)誤 3 下列信息中能為我們從基因文庫(kù)中獲取目的基因提供依據(jù)的是 基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)A B C D 答案A解析本題考查基因工程中目的基因的獲取的相關(guān)問(wèn)題 要從基因文庫(kù)中得到我們需要的目的基因 需要根據(jù)目的基因的有關(guān)信息 例如 根據(jù)基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA 以及基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來(lái)獲取目的基因 4 2015 無(wú)錫質(zhì)檢 下列有關(guān)基因表達(dá)載體的構(gòu)建的說(shuō)法中 不正確的是 A 需要限制酶和DNA連接酶參與B 任何基因表達(dá)載體的構(gòu)建都是一樣的 沒(méi)有差別C 可用抗生素基因作為標(biāo)記基因D 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟答案B 解析構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和載體 以產(chǎn)生相同的黏性末端 然后用DNA連接酶連接 由于受體細(xì)胞有植物 動(dòng)物和微生物之分 以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同 因此 基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有所差別 不可能是千篇一律的 抗生素基因的作用是作為標(biāo)記基因 鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因 從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是整個(gè)基因工程的核心環(huán)節(jié) 一 基因工程的理論基礎(chǔ)1 基因拼接的理論基礎(chǔ) 1 DNA是生物的主要遺傳物質(zhì) 2 DNA的基本組成單位都是四種脫氧核苷酸 3 雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是規(guī)則的雙螺旋 DNA重組技術(shù)的基本工具 2 外源基因在受體內(nèi)表達(dá)的理論基礎(chǔ) 1 基因是控制生物性狀的基本單位 具有獨(dú)立性 2 遺傳信息的傳遞都遵循中心法則所闡述的信息流動(dòng)方向 3 生物界共用一套密碼子 二 DNA重組技術(shù)的基本工具1 限制性核酸內(nèi)切酶 1 來(lái)源 主要從原核生物中分離 2 功能 能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列 并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi) 3 切割后的末端有黏性末端和平末端兩種 2 DNA連接酶 1 功能 將切下來(lái)的DNA片段拼接成新的DNA分子 2 作用位點(diǎn) 兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 3 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 1 載體種類 質(zhì)粒 噬菌體的衍生物 動(dòng)植物病毒 最常用的載體是質(zhì)粒 2 作為載體的條件 一 DNA連接酶與DNA聚合酶的比較 二 限制酶和DNA連接酶的區(qū)別與聯(lián)系 A 質(zhì)粒用限制酶 切割 目的基因用限制酶 切割B 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶 切割C 質(zhì)粒用限制酶 切割 目的基因用限制酶 切割D 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶 切割解析一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子 答案A 除了下列哪一項(xiàng)之外 其余的都是基因工程的運(yùn)載體所必須具備的條件 A 能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并保存B 具有多個(gè)限制酶切點(diǎn) 以便與外源基因連接C 具有標(biāo)記基因 便于進(jìn)行篩選D 是環(huán)形狀態(tài)的DNA分子答案D解析原核細(xì)胞如細(xì)菌的核DNA也是環(huán)狀DNA 但不能作運(yùn)載體 因?yàn)樗痪邆銩 B C三個(gè)條件 基因工程的基本操作程序和應(yīng)用 3 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 4 目的基因的檢測(cè)與鑒定 2 基因工程的應(yīng)用 1 乳腺生物反應(yīng)器與工程菌生產(chǎn)藥物的比較 2 基因治療與基因診斷 1 限制酶剪切目的基因與質(zhì)粒的次數(shù)不同 獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切2次 共產(chǎn)生4個(gè)黏性末端或平末端 切割質(zhì)粒則只需要限制酶剪切1次 因?yàn)橘|(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子 而目的基因在DNA分子鏈上 2 目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的 基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控 所以目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間的部位 3 基因工程操作過(guò)程中只有第三步 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象 第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得DNA 第二步存在黏性末端連接現(xiàn)象 第四步存在檢測(cè)分子水平雜交 4 并非所有個(gè)體都可作為乳腺生物反應(yīng)器 操作成功的應(yīng)該是雌性個(gè)體 個(gè)體本身的繁殖速度較高 泌乳量 蛋白含量等都是應(yīng)該考慮的因素 5 DNA復(fù)制 PCR技術(shù)與基因克隆 A B C D 解析根據(jù)基因工程一般要經(jīng)歷四個(gè)步驟分析 上述 操作是正確的 將毒素蛋白注射到棉受精卵中 沒(méi)有獲得目的基因 將編碼毒素蛋白的DNA序列 注射到棉受精卵中 沒(méi)有將目的基因與載體結(jié)合 所以 是錯(cuò)誤的操作 答案C 2015 銀川質(zhì)檢 科學(xué)家將發(fā)光基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi) 培育出了發(fā)光的煙草 如圖 下列有關(guān)該過(guò)程中應(yīng)用的技術(shù)的敘述 不正確的是 A 該技術(shù)是在DNA水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的B 該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體內(nèi)C 該技術(shù)的原理是基因重組D 該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是定向產(chǎn)生人類需要的生物類型 答案B解析本題以發(fā)光煙草為素材命題 主要考查基因工程概念的內(nèi)涵和外延 根據(jù)圖中信息可知培育發(fā)光煙草應(yīng)用的技術(shù)為基因工程 該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體外 B錯(cuò)誤 蛋白質(zhì)工程與基因工程 1 區(qū)別 2 聯(lián)系 1 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上 延伸出來(lái)的第二代基因工程 2 基因工程中所利用的某些酶需要通過(guò)蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾 改造 二者都屬于分子水平的操作 蛋白質(zhì)工程的本質(zhì)是通過(guò)改造基因進(jìn)而形成自然界不存在的蛋白質(zhì) 所以被形象地稱為第二代基因工程 解析基因工程是通過(guò)對(duì)基因的操作 將符合人們需要的目的基因?qū)脒m宜的生物體 使其高效表達(dá) 從中提取所需的基因控制合成的蛋白質(zhì) 或表現(xiàn)某種性狀 蛋白質(zhì)產(chǎn)品仍然為天然存在的蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)工程卻是對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因進(jìn)行改造 從而實(shí)現(xiàn)對(duì)其編碼的蛋白質(zhì)的改變 所得到的已不是天然的蛋白質(zhì) 題目中的操作中涉及的基因顯然不再是原來(lái)的基因 其合成的 干擾素也不是天然 干擾素 而是經(jīng)過(guò)改造的 是人類所需的蛋白質(zhì) 因而整個(gè)過(guò)程利用的生物技術(shù)應(yīng)為蛋白質(zhì)工程 答案B 科學(xué)家依據(jù)基因工程的原理最新研制的某種疫苗是用病原微生物編碼抗原的基因制成的 這個(gè)基因編碼的產(chǎn)物能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng) 該疫苗 A 引起人體特異性免疫的原因是DNA分子上具有抗原B 引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多 細(xì)胞周期將變長(zhǎng)C 能與漿細(xì)胞產(chǎn)生的相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合D 包括抗原基因 啟動(dòng)子 終止子和標(biāo)記基因等 答案D解析基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心 其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可以遺傳給下一代 同時(shí) 使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用 其基因表達(dá)載體的組成有目的基因 啟動(dòng)子 終止子以及標(biāo)記基因等 例1 我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低 科研人員通過(guò)基因工程等技術(shù) 培育出了鐵含量比普通大米高60 的轉(zhuǎn)基因水稻 改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì) 下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖 請(qǐng)回答下列問(wèn)題 1 在上述工程中 鐵結(jié)合蛋白基因稱為 獲取該基因后常用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增 2 構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí) 通常要用同種限制酶分別切割 和 將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí) 可以用 處理農(nóng)桿菌 使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入 3 將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí) 通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng) 可以獲得 培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是 4 檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到 需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻 解析本題中培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是培育出鐵含量比普通大米高的水稻 因此目的基因?yàn)殍F結(jié)合蛋白基因 要大量獲得一般采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增 要構(gòu)建重組質(zhì)粒要用同一種限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒 將外植體培養(yǎng)成試管苗的過(guò)程要用到不同的培養(yǎng)基 培養(yǎng)基最明顯的差別在于所添加激素的種類和比例的不同 培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是獲得鐵含量較高的大米 因此檢測(cè)時(shí)應(yīng)看轉(zhuǎn)基因水稻種子中鐵的含量 答案 1 目的基因PCR 2 含目的基因的DNA片段質(zhì)粒CaCl2 3 含有重組質(zhì)粒的愈傷組織生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例不同 4 種子中鐵的含量 技法提煉解答有關(guān)基因工程基本操作程序題目的一般步驟一要分辨限制酶的種類及識(shí)別序列和切割位點(diǎn) 在切割目的基因和載體時(shí) 一般用同一種限制酶切割 也可用不同的限制酶切割 但兩種限制酶切割后產(chǎn)生的黏性末端中堿基要互補(bǔ)配對(duì) 二要找出標(biāo)記基因 目的基因及其插入位點(diǎn) 一般來(lái)說(shuō) 質(zhì)粒中至少有一個(gè)標(biāo)記基因 如抗生素抗性基因 明確目的基因的插入位點(diǎn)是在標(biāo)記基因內(nèi)部還是標(biāo)記基因之外 三要分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標(biāo)記基因 如果質(zhì)粒中有一個(gè)標(biāo)記基因 插入后一般不破壞標(biāo)記基因 如果質(zhì)粒中有兩個(gè)標(biāo)記基因 則需看標(biāo)記基因中是否有插入位點(diǎn) 如果某一標(biāo)記基因中有插入位點(diǎn) 則目的基因插入質(zhì)粒后該標(biāo)記基因被破壞 四要理清判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法 一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌 如果有兩種抗生素基因 還需判斷用哪一種抗生素來(lái)判斷 對(duì)基因工程中易錯(cuò)點(diǎn)辨析不清 例2 下列關(guān)于基因工程的敘述 錯(cuò)誤的是 A 目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng) 植物或微生物B 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C 人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D 載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)答案D 解析基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)物 植物或微生物 常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 只有經(jīng)過(guò)一定的物質(zhì)激活以后 才有生物活性 載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞 不能促進(jìn)目的基因的表達(dá) 所以D錯(cuò)誤 錯(cuò)因分析對(duì)標(biāo)記基因的作用模糊不清 糾錯(cuò)筆記 基因工程中有3種工具 但工具酶只有2種 工具酶本質(zhì)為蛋白質(zhì) 載體本質(zhì)為小型DNA分子 但不一定是環(huán)狀 標(biāo)記基因的作用 篩選 檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 常見(jiàn)的有抗生素抗性基因 發(fā)光基因 表達(dá)產(chǎn)物為帶顏色物質(zhì)等 受體細(xì)胞中常用植物受精卵或體細(xì)胞 經(jīng)組織培養(yǎng) 動(dòng)物受精卵 一般不用體細(xì)胞 微生物 大腸桿菌 酵母菌等 一般不用支原體 原因是它營(yíng)寄生生活 一定不能用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞 原因是它無(wú)細(xì)胞核 不能合成蛋白質(zhì)