啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈式反應擴增DNA片段練習(打包6套)新人教版.zip
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基礎知識:PCR的反應過程
1. 下列對PCR過程中“溫度的控制”的敘述中不正確的是( ?。?A.PCR反應需要高溫,是為了確保模板是單鏈
B.延伸的溫度必須大于復性溫度,而小于變性溫度
C.要用耐高溫的DNA聚合酶
D.需要耐高溫的解旋酶
2. 洗滌紅細胞時,離心所采用的方法是( )
A.低速長時間離心 B.低速短時間離心
C.高速長時間離心 D.高速短時間離心
3. 下列各項中,一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是( )
A.層析柱高 B.層析柱的直徑
C.緩沖溶液 D.樣品的分布
4. 聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95 ℃下使模板DNA變性、解鏈→55 ℃下復性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72 ℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關PCR過程的敘述中不正確的是( )
A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)
B.復性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補配對原則完成
C.延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
D.PCR與細胞內(nèi)DNA復制相比,所需要酶的最適溫度較高
5. 下列關于PCR技術(shù)的描述,錯誤的是( )
A.以DNA復制為基礎而建立起來的技術(shù)
B.利用PCR技術(shù)可完全無誤的擴增基因
C.反應體系需要模板、引物、四種脫氧核苷酸、耐熱DNA聚合酶和緩沖溶液
D.以變性、復性和延伸為一個周期
6. DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開的溫度范圍是( ?。?。
A.10~20 ℃ B.80~100 ℃
C.20~30 ℃ D.40~60 ℃
7. 在PCR擴增的實驗中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實驗得到的產(chǎn)物中,卻有兩種DNA。其原因可能是( )
A.基因突變 B.Taq聚合酶發(fā)生變異
C.基因污染 D.溫度過高
8. PCR儀實質(zhì)上是一臺自動調(diào)控溫度的儀器,下列關于它調(diào)控不同溫度的目的敘述錯誤的是( )
A.94 °C,使DNA分子變性,解開螺旋
B.55 °C,引物與作為模板的單鏈DNA特定部位相互配對、結(jié)合
C.72 °C,使DNA分子開始復制,延伸
D.72 °C,使DNA分子恢復雙螺旋結(jié)構(gòu),恢復活性
9. PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù),其基本原理和過程與細胞內(nèi)DNA的復制類似.下列關于兩者共同點的敘述,不正確的是( ?。?
①邊解旋邊復制
②遵循堿基互補配對原則
③需要引物
④過程可分為變性、復性、延伸等步驟.
A.①⑦ B.⑦③
C.③④ D.①④
10. PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈式反應,現(xiàn)在已成為分子生物學實驗室的一種常規(guī)手段,它可以在體外很短的時間內(nèi)將DNA大量擴增。你認為以下符合在體外進行PCR反應條件的一組是( )
① 穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四種脫氧核苷酸
⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸內(nèi)切酶 ⑧ 溫控設備
A.①②③④⑤⑥ B.①②③④⑤⑥⑦⑧
C.③④⑤⑥⑧ D.①②③④⑤⑧
參考答案:
1. 答案: D
解析: PCR是體外DNA擴增技術(shù),DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解體。復性前,在耐高溫的Taq DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復性溫度但小于變性溫度。
2. 答案: B
解析: 洗滌紅細胞時,轉(zhuǎn)速要低,時間要短,否則白細胞會與之一起沉淀,達不到分離目的。
3. 答案: B
解析: 分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱必須有適宜的高度,分離度與柱高相關。樣品的分布也影響分離度,緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷,因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會影響分離度。
4. 答案: C
解析: 變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn);復性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補配對原則完成;延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸;PCR與細胞內(nèi)DNA復制相比,所需要酶的最適溫度較高
5. 答案: B
解析: 利用PCR技術(shù)也可能會出現(xiàn)擴增的基因出現(xiàn)錯誤。故選B
6. 答案: B
解析: 蛋白質(zhì)大多不能忍受60~80 ℃的高溫,而DNA在80 ℃以上才會變性。
7. 答案: C
解析: 實驗中得到兩種DNA的原因可能是靶細胞基因污染造成的,所以在實驗中,必須做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。
8. 答案: D
解析: PCR利用DNA熱變性的原理,當溫度上升到94 °C時,雙鏈DNA解旋為單鏈,A項正確;當溫度下降到40~60 °C左右時,兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結(jié)合,B項正確;當溫度上升到72 ℃左右時,在DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈,從而實現(xiàn)DNA延伸,故C正確,D錯誤。
9. 答案: C
解析: 解:①PCR反應和體內(nèi)DNA復制都是邊解旋邊復制,故①正確;
②PCR反應和體內(nèi)DNA復制都遵循堿基互補配對原則,故②正確;
③PCR反應需要引物,但體內(nèi)DNA復制不需要引物,故③錯誤;
④PCR過程可分為變性、復性、延伸等步驟,而體內(nèi)DNA復制沒有這些步驟,故④錯誤.
故選C.
10. 答案: D
解析: 試題分析:在PCR技術(shù)中,需要的條件有模板、引物、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶,此外還需要適宜的溫度和pH,故D正確。
考點:本題主要考查PCR的過程,意在考查考生能理解所學知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。
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