啟東市高中生物專(zhuān)題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)(打包6套)新人教版.zip
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實(shí)驗(yàn)——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段
1. 在進(jìn)行PCR操作時(shí),如果槍頭受到污染,則會(huì)影響到
A. 復(fù)制循環(huán)速度 B. DNA分子純度 C. DNA分子大小 D. 酶催化活性
2. 下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述,正確的是( )
A. PCR技術(shù)建立在對(duì)擴(kuò)增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上
B. 該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶
C. 該技術(shù)需要一對(duì)特異性的引物,要求一對(duì)引物的序列是互補(bǔ)的
D. 該技術(shù)應(yīng)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制原理,也需要模板、原料、能量、酶等條件
3. PCR實(shí)驗(yàn)中用到微量離心管、緩沖液和蒸餾水,使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是( ?。?A.反復(fù)洗滌 B.用酒精擦洗
C.高壓滅菌 D.在-20 ℃保存
4. DNA在波長(zhǎng)為多大的時(shí)候有一強(qiáng)烈的吸收峰( ?。?A.260nm B.240nm C.280nm D.300nm
5. PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。下列防止污染的辦法中不包括的是( )
A.將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行
B.吸樣槍吸樣要慢,吸樣時(shí)盡量一次性完成,槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用,以免交叉污染
C.所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝,以減少重復(fù)加樣次數(shù),避免污染機(jī)會(huì)
D.PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開(kāi)保存,不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱
6. 在PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物卻有2種DNA。其原因可能是( )
A.基因突變 B.Taq聚合酶發(fā)生變異
C.基因污染 D.溫度過(guò)高
7. 關(guān)于PCR技術(shù)的應(yīng)用,錯(cuò)誤的一項(xiàng)是( )
A.古生物學(xué)、刑偵破案、DNA序列測(cè)定
B.診斷遺傳病、基因克隆、古生物學(xué)
C.DNA序列測(cè)定、基因克隆、刑偵破案
D.診斷遺傳病、合成核苷酸、DNA序列測(cè)定
8. PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實(shí)際上是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器,對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的說(shuō)法中錯(cuò)誤的是( )
A.酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈
B.延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度
C.DNA聚合酶不具熱變性,要用耐高溫的聚合酶
D.DNA解旋酶不具熱變性,為了確保模板是單鏈
9. 關(guān)于DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是( )
A.DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA,只能從5′端延伸DNA鏈
B.DNA復(fù)制不需要引物
C.引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合
D.DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸
10. 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是:( )
A.變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)
B.復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成
C.延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高
參考答案:
1. 答案: B
解析: ?
2. 答案: D
解析: ?
3. 答案: C
解析: 在PCR實(shí)驗(yàn)中,為了避免外源DNA等因素的污染,微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。同時(shí)也不能忽視其他操作步驟,如緩沖液和酶應(yīng)該分裝成小份,并且在-20 ℃保存。
4. 答案: A
解析: ?
5. 答案: C
解析: 所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝,一次性用完,避免因多次使用造成污染。
6. 答案: C
解析: 其原因可能是基因污染。在PCR實(shí)驗(yàn)中,一定要做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡(jiǎn)化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。
7. 答案: D.
解析: PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上用于遺傳病的基因診斷、基因克隆、DNA序列測(cè)定,法醫(yī)上用于刑偵破案,古生物學(xué)上用于生物化石樣品分析.PCR技術(shù)是以4種脫氧核苷酸為原料,合成雙鏈DNA的過(guò)程,PCR技術(shù)不能合成核苷酸.
8. 答案: D.
解析: PCR是一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù).DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開(kāi),延伸時(shí),在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度.
9. 答案: C
解析: 由于DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA,只能從引物的3′端開(kāi)始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5′端向3′端延伸。
10. 答案: C
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